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钩吻(Gelsemium elegans benth,GEB)为马钱科胡蔓藤属植物,是世界闻名的剧毒植物,主要含有多种吲哚类生物碱。钩吻素子(Koumine,Kou)是从钩吻中分离的一种生物碱单体,分子式C2oH22N2o,分子量306.8,为白色结晶,难溶于水,其为钩吻的主要成分,约占总碱的30%。以往报导钩吻植物及其提取物具有抗肿瘤作用、抗炎镇痛及免疫促进作用、乙酰胆碱样作用等。 本课题利用形态学、细胞生物学、分子生物学等方法并结合流式细胞术,研究了Kou体外对人结肠腺癌Lovo细胞的生长及凋亡的影响,并利用粘附细胞术对其生理学机制进行初步探讨,主要结果如下: 1、钩吻素子(Kou)体外可抑制Lovo细胞的生长,并呈剂量依赖及 时间依赖性。 2、Kou体外可诱导Lovo细胞凋亡。 3、Kou能降低Lovo细胞跨膜电位(MP)。 4、Kou能降低Lovo细胞线粒体跨膜电位(ψm)。 5、Kou能降低细胞内游离Ca2+浓度[Ca2+]i,加入EDTA后可使 [Ca2+]i升高。 6、Kou能增高Lovo细胞的活性氧(ROS)。 7、Kou对Lovo细胞的细胞内pH值(pHi)无明显影响。 8、Kou能升高Lovo细胞的细胞间通讯(GJIC)功能。 9、Kou能降低Lovo细胞的膜脂流动性。 总之,Kou体外具有对Lovo细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。Kou诱导Lovo细胞凋亡的部分机制可能是通过作用于某种膜离子通道、载体蛋白或离子泵,使其电耦联障碍,进而影响其信号转导过程;并降低细胞的膜脂流动性,影响其代谢耦联;同时上调细胞的GJIC功能,从而使这一效应迅速在细胞间传播得以实现。