人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)与人单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus1, HSV-1)以及EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)同属疱疹病毒科,是导致新生儿发育异常、感觉神经性耳聋、智力低下的首要病毒性病因,是一类重要的普遍性感染的人类医学病毒。HCMV基因组的复制发生在细胞核中,被认为是病毒进入裂解循环的中心环节,同时也是是一个高度复杂和调控的过程,涉及到复制相关蛋白内部,与复制起始位点之间,以及同宿主细胞因子的相互作用。本研究在实验室前期通过高通量酵母双杂交技术筛选HCMV复制蛋白与宿主细胞因子相互作用的数据基础上,通过酵母双杂交和蛋白质免疫共沉淀以及细胞激光共聚焦进一步证实了HCMV引物酶相关因子UL102与宿主细胞转录共抑制子CtBP2以及解旋酶UL105与Snapin这两对相互作用,并首次进行了深入的生物学意义的研究。先前报道HCMV引物酶相关因子UL102的主要功能是参与并调节解旋酶-引物酶复合体(UL105,UL70和UL102)的活性。通过特异性针对CtBP2的小RNA干扰的下调和过表达CtBP2以及改进的HCMV复制子系统,本研究揭示了一个全新的对抗HCMV感染的细胞限定因子CtBP2,作为转录共抑制子不仅可以抑制病毒立即早期启动子(major immediate-early promoter, MIEP)的表达,而且可以通过与引物酶相关因子UL102的直接相互作用影响HCMV的复制。同时,通过双荧光报告系统,我们发现病毒晚期,随着UL102表达的积累,UL102也可以通过与CtBP2的相互作用解除抑制作用,并且调节病毒晚期基因的表达。最后,CtBP2的稳定持续表达有助于低感染剂量下(Multiplicity of infection, MOI) HCMV病毒在细胞内的持续性感染。HCMV解旋酶UL105参与病毒基因组复制过程中沿着后随链(lagging strand)持续的解开复制叉前面的双链Ⅰ)NA。HCMV的DNA合成发生在细胞核之中,因此作为复制的必需蛋白之一,UL105入核是必要的。本研究发现宿主细胞因子Snapin(主要定位于细胞质并与囊泡膜蛋白结合)通过与HCMV解旋酶UL105的相互作用,限制了UL105作为主要复制蛋白进入细胞核。通过特异针对Snapin的小干扰RNA的下调和稳转过表达Snapin可以改变UL105在细胞核质中的分布比例,从而影响HCMV的复制进程和子代病毒的产生。参与复制的6个核心复制蛋白(UL44、UL54、UL57、UL70、UL102、UL105)同所有的疱疹病毒一样具有高度的序列和功能保守性,通常作为FDA批准的抗疱疹病毒治疗的主要药物靶标。本论文所研究的两对HCMV复制蛋白与宿主细胞因子间的相互作用,将有利于更加深入的理解宿主细胞针对HCMV基因组复制的这一核心环节而发展的对抗HCMV感染的策略以及病毒与细胞之间的拮抗关系,为发展新的抗病毒治疗方法提供了参考依据。