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研究背景:红花属于菊科植物,作为一种传统中药,对于跌打损伤以及血液循环系统疾病都有显著的疗效。研究证明,其水溶性成分羟基红花黄色素A已经被证实具有降脂、降压、抗肿瘤等功效。近期,课题组合作实验室从红花中得到了一种黄酮类单体化合物,与羟基红花黄色素A互为同分异构体,名为羟基红花黄色素B,除了抗氧化作用外,对于其药理药效的研究报道目前较少。目的:探究羟基红花黄色素B对人乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响,同时对其相关分子机制进行进一步探索。方法:采用MTT法检测不同浓度羟基红花黄色素B对MCF-7细胞增殖的影响;采用集落生成实验检测不同浓度HSYB对MCF-7细胞集落形成能力的影响;采用Hoechst 33258检测HSYB对MCF-7细胞凋亡形态的影响;使用流式分析仪检测不同浓度HSYB对MCF-7凋亡率的影响;使用流式分析仪检测不同浓度HSYB对MCF-7细胞周期的影响;使用流式分析仪检测不同浓度HSYB对MCF-7线粒体膜电势的影响;采用Western Blot法检测凋亡与周期相关蛋白及PI3K/AKT通路上的相关蛋白,如PI3K、p-PI3k、AKT、p-AKT等。结果:人乳腺癌MCF-7细胞经不同浓度HSYB处理后,细胞增殖受到显著抑制,并且呈现出浓度依赖性效应。进一步研究发现,与对照组相比,HSYB处理组细胞显著阻滞在S期,周期相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E和CDK2的表达下调;同时,p-PI3K,PI3K,AKT和p-AKT等蛋白水平显著下调。凋亡实验结果显示,经HSYB处理过的MCF-7细胞在细胞形态上出现典型的凋亡形态学特征,流式细胞仪结果显示HSYB可以降低MCF-7的线粒体膜电势。凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低的同时,Bax、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9等相关的蛋白分子水平升高。结论:HSYB可显著抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖,其作用机制可能与将MCF-7细胞周期阻滞在S期,以及诱导细胞凋亡有关。