论文部分内容阅读
多糖是指分子中含有10个以上的一种或多种单糖单元,除了具有免疫调节功能、抗肿瘤、抗氧化作用、降血脂、降血糖、抗病毒作用,还具有其它多种生物功能。本研究的目的是确定沙棘多糖高效提取和纯化关键技术参数,建立沙棘多糖高效提取和纯化工艺路线。试验以大庆巨福酒业沙棘果渣为原料,采取单因素试验、正交试验研究了沙棘多糖提取、纯化、树脂吸附分离的工艺条件,对精多糖的分级、分子量进行了研究,以及采用电泳、紫外光谱、红外光谱、高效液相色谱等方法分析沙棘多糖结构。1.热水提取沙棘多糖的研究。采用单因素试验和正交试验设计研究了提取温度、料液比、时间等因素对沙棘多糖提取得率的影响,研究结果为:料液比1:25(g/mL),温度80?C,时间40min,可得到沙棘多糖粗提取液,其提取得率达到102.36mg·g-1。2.微波辅助提取沙棘多糖的研究。采用单因素试验和正交试验设计研究了微波功率、料液比、萃取时间等因素对沙棘多糖提取得率的影响,研究结果为:料液比1:45(g/mL),微波功率为560w,提取时间50s,可得到沙棘多糖粗提取液,其提取得率达到19.04 mg·g-1。3.超声波法提取沙棘多糖的研究。采用单因素试验和正交试验设计研究了超声波功率、超声波提取时间、料液比和提取温度等因素对沙棘多糖提取得率的影响,研究结果为:在超声波功率为强的条件下,料液比1:50(g/mL),温度60℃,提取时间20min,可得到沙棘多糖粗提取液,其提取得率达到88.09 mg·g-1。4.酶法提取沙棘多糖的研究。采用单因素试验和正交试验设计研究了加酶量、pH值、温度、时间等因素对沙棘多糖提取得率的影响,研究结果为:pH7.5,提取温度45℃,2%加酶量,提取时间50min,可得到沙棘多糖粗提取液,其提取得率达到65.91mg·g-1。5.酶法-超声波协同提取沙棘多糖的研究。在已确定的超声波提取法和酶法提取的最佳工艺基础上,将这两种方法以不同方式进行结合,得出料液比1:50(g/mL)、pH7.5、温度45℃、2%加酶量、强功率下超声波时间20min,继续酶提30min而后灭酶,提取得率达到81.5 mg·g-1。6.大孔树脂分离沙棘多糖工艺条件的研究。将去蛋白后的沙棘多糖粗提取液用大孔径弱极性交换树脂吸附分离,通过单因素试验研究了温度、pH值、上样液浓度、振荡转速等4个因素对吸附效果的影响,通过单因素试验研究了料液浓度、洗脱剂、流速等3个因素对解析效果的影响,优化了工艺参数,结果为:AB-8树脂在吸附液28℃,pH9.0,浓度1.482mg·mL-1,振荡转速200rpm时吸附效果最好,0.2mol·L-1 NaCl浓度梯度流速为60rpm洗脱纯化效果最好。AB-8树脂分离纯化使沙棘多糖的纯度达到71.45%。7.沙棘多糖的纯化和结构分析。采用酸性乙醇分级沉淀所得多糖GZT2含量最高。通过融冻离心、电泳、紫外光谱、红外光谱等对沙棘多糖结构进行分析,高效液相色谱测定多糖纯度为99.66%,表明沙棘多糖提取物为均一组份,无蛋白和核酸杂质,沙棘多糖级分GZT2的分子量为10.9×104Da,该多糖级份既有α糖苷键也有β糖苷键,其单糖组成为:葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖,主要组成双糖为a-DUA-[1-4]-GIcNAc。