论文部分内容阅读
牛奶作为一种高营养食品,可以补充人体所需的多种营养物质,逐渐受到人们的追捧。而近几年牛奶的加工技术不断提升,这使得牛奶的安全问题备受关注,抗生素广泛应用于畜牧业,过量使用会导致牛奶中抗生素残留,在牛奶加工储存中也容易受到致病菌污染,但目前的检测方法操作繁琐且耗时长,因此需要开发一种快速简便的检测方法。电化学传感器检测技术是一种新型的检测方法,具有操作简便、检测灵敏快速、价格低廉、性能稳定等优点,在食品中有害物质检测领域应用广泛。基于此,本文设计了三种电化学生物传感器用于检测金黄色葡萄球菌和青霉素钠,并与传统检测方法进行比较,检测结果无明显差异,表明传感器可以用于检测实际牛奶样品中的金黄色葡萄球菌和青霉素钠。1基于介孔SiO2的电化学免疫传感器的制备及对金黄色葡萄球菌的检测研究使用抗体(Ab)-多级介孔二氧化硅(HMS)生物结合物设计了一种灵敏的电化学免疫传感器,用于低浓度金黄色葡萄球菌(S.aureus)的无标记检测。首先,使用带有蝴蝶翅膀的生物模板方法来制备HMS,结果表明HMS不仅精确的复制了蝴蝶翅膀的形貌且具有多级孔结构。然后,将载体材料进行氨基官能化并以戊二醛为交联剂固载Ab,再将Ab-HMS生物结合物固定在玻碳电极(GCE)上,并通过分析抗原-抗体复合物形成后峰值电流的变化来检测金黄色葡萄球菌的存在。利用差分脉冲伏安法(DPV)检测浓度范围为10-2×103 CFU/mL的S.aureus,结果显示峰值电流变化与金黄色葡萄球菌浓度对数之间显示出良好的线性关系(r2=0.9759),且响应时间短(20分钟)和检测限低(11 CFU/mL)。在加标牛奶样品测试中,将传感器的性能与菌落计数方法进行了比较。结果显示测试结果无显着差异。因此,该电化学免疫传感器具有灵敏度高,特异性好和稳定性强的特点,可以用来快速检测牛奶样品中的金黄色葡萄球菌。2基于磁性介孔空心碳球的电化学酶传感器的制备及对青霉素钠检测研究使用青霉素酶(Pen X)-磁性介孔空心碳球(MMHC)结合物作为检测元件,对低浓度的青霉素钠(Pen G)进行检测,首先,以磁性四氧化三铁颗粒为模板制备MMHC。再利用较为简单的物理吸附方法将Pen X固载在MMHC上,并对吸附条件进行优化,将结合物固定在磁性玻碳电极(MGCE)上,得到工作电极Pen X-MMHC-MGCE。当Pen X与Pen G反应时会产生氢离子,溶液中氢离子增加会使苏木精发生氧化还原反应,所以以苏木精为检测指示剂添加到检测液中,使用DPV方法检测浓度范围为10-8-10-2 mg/mL的Pen G。结果显示峰电流值与Pen G浓度对数呈现良好的线性关系(R2=0.9983),其LOD为2.655×10-7mg/mL(S/N=3)。使用加标方法检测牛奶中的Pen G显示出良好的回收率,且检测结果与传统的高效液相方法相比无显著差异。此外,该方法具有检测范围广,酶吸附量大,检测速度快,固体物质清洗回收方便等优点,因此可以实现对牛奶样品中Pen G残留的快速检测。3基于菱形多孔碳的电化学酶传感器的制备及对青霉素钠的检测研究使用Pen X-菱形多孔碳(RPC)为检测元件,以苏木精为检测指示剂,检测低浓度的Pen G含量。首先制备铝基的金属有机框架(Al-MOF),以Al-MOF为模板通过高温煅烧制备RPC,利用化学共价结合方法将Pen X固定在材料上,对固载条件进行优化,将结合物固定在GCE上,得到工作电极Pen X-RPC-GCE。使用DPV方法检测浓度范围为10-8-10-55 mg/mL的Pen G,结果显示峰电流值与Pen G浓度对数呈现良好的线性关系(R2=0.9915),LOD为2.68×10-77 mg/mL(S/N=3),利用加标法检测实际牛奶样品并与高效液相方法比较,检测结果无显著差异。该方法中所用的材料制备方法简便,工作电极的响应电流大,稳定性好,检测时间快,可以用来检测实际牛奶样品中Pen G残留。