玫瑰茄细胞悬浮培养过程的动力学研究

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通过单因素变化考察了培养基中主要营养成分对悬浮培养玫瑰茄细胞生长和花青素合成的影响.在不同的碳源中,蔗糖和葡萄糖适合细胞生长,并有较高的花青素产率.在10~100g/L蔗糖浓度范围内,40g/L浓度下细胞生长量和花青素产率最高,而60g/L浓度下细胞的花青素含量最高.B5培养基的基本氮源已足够满足玫瑰茄细胞生长和花青素合成的需要.25:2、23:4、19:8三种NO3-/NH4+比例的培养基比较适合细胞生长和花青素合成.NO3-离子对细胞生长是必需的,但对花青素合成有一定抑制作用.过高的NH4+离子对细胞生长有明显的抑制作用,在一定范围内提高NH4+离子的浓度会促进细胞内花青素的积累.提高氮源总量对细胞生长有抑制作用,细胞的花青紊含量也降低.磷酸盐对细胞生长和花青素的合成都是必需的,但对两者的影响是相反的. 玫瑰茄细胞悬浮培养过程可以分为迟滞期、快速生长期及静止期三个阶段.低浓度时蔗糖是细胞生长的限制性基质;提高蔗糖浓度促进了细胞生长,快速生长期延长,收获细胞量大幅度提高;但浓度超过40g/L时则表现出对细胞生长的底物抑制作用.不同NO3-/NH4+比例对细胞生长的影响主要体现在高NH4+浓度对细胞生长的抑制作用.低浓度时磷酸盐也成为细胞生长的限制性基质.提高磷酸盐浓度使细胞生长速度加快,培养周期缩短,但收获细胞量基本恒定.基准培养条件下细胞比生长速率约为0.23~0.27day-1,倍增时间约为2.5~3天. 不同培养条件下细胞中花青素含量的变化趋势基本一致.初始磷酸盐的浓度对细胞中花青素含量的影响最显著.提高蔗糖浓度在一定程度上也促进了玫瑰茄细胞中花青素的合成.NH4+浓度过高则抑制了细胞中花青素的合成.培养过程中花青素总产量取决于玫瑰茄细胞量和细胞中花青素含量两个因素.在一定范围内,花青素最高产量随着蔗糖浓度的提高而提高;而在不同起始磷酸盐浓度的培养过程中,花青素最高产量变化不大. 玫瑰茄细胞中花青素积累与细胞生长之间为部分偶联的关系.当细胞比生长速率在0.15~0.25的范围时,花青素的比生成速率较高. 玫瑰茄细胞对蔗糖的利用采取先水解后吸收的方式.水解过程可用带底物抑
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