HER2基因对恶性脑膜瘤IOMM-Lee细胞株增殖和侵袭的影响

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目的:观察HER2基因是否影响恶性脑膜瘤细胞的增殖、侵袭,探讨HER2是否通过MAPK信号通路发挥作用。方法:1、通过病毒感染分别将沉默和过表达HER2基因质粒转染至恶性脑膜瘤IOMM-Lee细胞株中。实验分组:第一组:空白组(Blank);第二组:沉默阴性对照组(NC-sh);第三组:沉默HER2基因组(HER2-sh);第四组:过表达阴性对照组(NC-ox);第五组:过表达HER2基因组(HER2-ox)。使用q-PCR和Werstern blot检测各组细胞HER2 m RNA和蛋白表达水平。2、MTT、EdU法检测各组细胞的生长增殖情况;Transwell小室侵袭法、细胞划痕实验法检测各组细胞侵袭、迁移能力;流式细胞术检测各组细胞的细胞周期、凋亡变化。3、Western blot检测各组细胞ERK1/2、P-ERK1/2、JNK、P-JNK、ERK5、P-ERK5、P38、P-P38、ras蛋白的表达。4、体内裸鼠成瘤实验检测各组细胞增殖、侵袭的变化。结果:1、慢病毒转染成功,HER2在mRNA和蛋白水平达到分组要求。2、沉默HER2组细胞增殖能力减弱,侵袭、迁移能力降低;过表达HER2组细胞增殖能力增强,侵袭、迁移能力提高。HER2基因通过影响细胞周期中的G0/G1-S的变化而起作用;沉默HER2组脑膜瘤细胞凋亡率增加,过表达HER2组脑膜瘤细胞凋亡率降低。3、沉默和过表达HER2基因可影响恶性脑膜瘤细胞中MAPK信号通路ERK1/2、P-ERK1/2、JNK、P-JNK、ERK5、P-ERK5、ras蛋白的表达,差异有统计学意义,但对P38、P-P38蛋白的表达影响不大,差异无统计学意义。4、裸鼠成瘤实验,沉默HER2组,裸鼠成瘤能力减弱,瘤体增殖速度减慢;过表达HER2组,裸鼠成瘤能力增强,瘤体增殖速度加快,细胞侵袭、迁移能力增强。结论:1、HER2可促进恶性脑膜瘤细胞的增殖和侵袭;2、HER2基因可能通过MAPK信号通路影响恶性脑膜瘤细胞的生长、侵袭功能。
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