大肠杆菌O157是威胁食品安全的传染性病原菌。在大肠杆菌O157的致病过程中，粘附是重要的环节，但对于其粘附现象现在的认识很不全面。本研究发现以往研究发现该菌的ycbR基因与其对HEp-2细胞的粘附现象有关。本课题的目的是克隆和表达ycbR基因，将表达产物免疫动物得到效价好的抗血清，进而利用抗血清进行体外粘附阻断实验。本课题根据大肠杆菌O157ycbR基因设计表达引物，分别在上下游引物中加入了Nco I和Xho I的酶切位点，从大肠杆菌O157基因组中克隆大肠杆菌O157ycbR基因，将目的基因连接T载体，转入大肠杆菌DH5α中进行PCR鉴定、酶切鉴定和测序鉴定。同时分析预测表达蛋白的理化性质和疏水性。与GenBank报道序列比较，获得的ycbR基因没有发生突变。用限制性内切酶Nco I、Xho I分别双酶切T-ycbR阳性重组质粒和pET-28α表达载体，连接并转入表达宿主大肠杆菌BL21，成功构建了ycbR原核表达系统。发酵培养并诱导表达得到包涵体形式的蛋白，经镍柱分离纯化获得带组氨酸标签的重组蛋白，表达量约占菌体蛋白的56%。将纯化后得到的表达产物皮下注射免疫家兔，多次加强免疫后心脏采血并分离得到YCBR蛋白的免疫血清。用间接ELISA法测定血清的抗体效价和敏感度，并以方阵法确定最佳抗原浓度和抗体稀释浓度。在抗原浓度分别0.5μg/mL、2μg/mL、5μg/mL时，对应抗体效价分别在1:800，1:800，1:1600。血清抗体对抗原蛋白的敏感度为0.25μg/mL。本研究克隆和表达了大肠杆菌O157的ycbR基因，实现了体外的高效表达，并制备了表达产物的抗血清。研究为进一步阐明ycbR基因的表达产物是否参与大肠杆菌O157粘附作用奠定了基础，为阐明大肠杆菌O157的致病机理和食品检验提供科学依据。