辛基酚致大鼠睾丸Sertoli细胞损伤及其机制的研究

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第—部分 辛基酚对大鼠睾丸Sertoli细胞凋亡的影响 为探讨OP对大鼠睾丸Sertoli细胞的凋亡作用及其机制,选取青春期雄性SD大鼠(25-30d),在建立睾丸Sertoli细胞体外原代培养模型的基础上,以30-60μM浓度的OP作用于Sertoli细胞24小时或60μM OP作用于Sertoli细胞6-24小时。采用透射电镜、流式细胞仪和Hoechst染色法检测细胞凋亡及凋亡的发生率;RT-PCR法分析Sertoli细胞中Bcl-2、Bax的mRNA表达量变化;Western blot法分析Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白的表达情况。主要结果如下: 1.电镜下,对照组Sertoli细胞体积较大,胞质和滑面内质网丰富,线粒体和溶酶体常见,细胞核不规则,有核裂,单染色质丰富,核仁明显,有时可以看到1-2个卫星核小体;OP处理组可见大量的、各期的凋亡细胞,表现为细胞核染色质凝集、边集,细胞出现核碎裂,胞质出芽等现象以及形成典型的凋亡小体,但细胞膜结构仍然完整。 2.TUNEL分析的结果显示,不同浓度OP处理Sertoli细胞24h后,凋亡细胞的百分率随OP浓度的增加而增加。
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