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白化病是大菱鲆海水养殖中的一种多发病，而酪氨酸酶是黑色素生成过程中的一个关键酶。为了阐明酪氨酸酶与大菱鲆白化发生之间的关系，本文采用L-多巴染色法从生化和组化两方面对大菱鲆正常个体和白化个体的酪氨酸酶活性进行了测定，其次本文还对大菱鲆正常和白化皮肤中黑色素细胞的超微结构进行了观察。为了进一步了解大菱鲆白化的遗传背景，本文采用抑制性消减杂交的方法对大菱鲆正常皮肤和白化皮肤中特异表达的基因片段进行了分离，克隆和序列测定。 生化分析结果表明：(1)在大菱鲆正常个体有眼侧皮肤(PON，pigmented skin on ocular side of normal turbot)、正常个体无眼侧皮肤(WBN，white skin on blind side of normal turbot)、白化个体有眼侧白化皮肤(AOA，albino skin on ocular side of albino turbot)、白化个体无眼侧皮肤(WBA，white skin on blind side of albino turbot)的抽提液中都能检测到酪氨酸酶的活性，分别为在同一个体中有眼侧皮肤抽提液中检测到的酪氨酸酶活性要明显的高于无眼侧皮肤抽提液中酪氨酸酶的活性；在AOA皮肤中酪氨酸酶的活性要比PON皮肤中酪氨酸酶的活性高出56％。(2)本文比较了不同温度、盐度、pH值以及三种激活剂对大菱鲆PON皮肤和AOA皮肤抽提液中酪氨酸酶活性的影响，结果表明：温度和盐度对PON皮肤和AOA皮肤抽提液中的酪氨酸酶活性的影响是相似的，它们的最适温度是55～60℃，最适的盐度是26‰；但是，pH值对PON皮肤和AOA皮肤中酪氨酸酶活性的影响有所不同，正常大菱鲆有眼侧皮肤中酪氨酸酶活性在pH7.0时最高，而对于大菱鲆白化个体有眼侧皮肤中酪氨酸酶活性在pH8.0时最高，三种激活剂十二烷基硫酸钠、胰蛋白酶和酵母聚糖都能显著提高PON和AOA皮肤中酪氨酸酶的活性，但对AOA皮肤中酪氨酸酶的激活作用明显高于PON皮肤。口吮芡纤白化病白化发生机是理笼开乡七 组织化学染色显示:酪氨酸酶的活性只出现在大菱醉PON皮肤中，而AOA、WBN、WBA三种皮肤中都没有酪氨酸酶活性。在PON皮肤中发现了大量的黑色素细胞，而AOA、WBA、WBN中没有黑色细胞。 本文对成体大菱坪PON和AOA皮肤的电子显微镜观测结果显示:成体大菱虾正常个体有眼侧皮肤中有黑色素细胞和虹彩细胞两种色素细胞，沿细胞长轴排列。黑色素细胞排列紧密，其中聚集大量的黑色素体，虹彩细胞紧密的排列在黑色素细胞的下面。成体大菱虾白化个体有眼侧皮肤中黑色素细胞退化凋亡。 根据以上生化、组化和电镜的结果‘，我们认为在大菱虾AOA皮肤中能够表达出大量正常酪氨酸酶，但是由于缺乏黑色素细胞及其中的黑色素体提供一个适宜的微环境，酪氨酸酶的活性被某种未知因子抑制，但是这种抑制作用可为细胞匀浆作用所解除。 本文还利用抑制性消减杂交(Supressed subtraetion hybridizati。nSSH)方法得到大菱坪皮肤中特异性表达的差异cDNA。从AOA皮肤cDNA中随机选择14个片段测序分析:得到一个基因片段，与青鳃鱼和河豚的酪氨酸酶基因对比同源性只有25%和26.5%。另外得到一组线粒体自身编码的基因，包括细胞色素c氧化酶亚单位基因、NADH脱氢酶基因、Al…P合成酶亚单位的基因和tRNA一Val的基因，它们的同源性1 00%。3个特意表达的基因片段，与恶性黑色素瘤细胞中特异表达的基因有同源性。 从PON皮肤cDNA中随机选择19个片段测序分析，经GeneBankBtast后，得到16个特异表达的基因片段，与恶性黑色素瘤细胞中特异表达的基因有同源性，在这一组基因中发现有两个同源性非常高的保守区域。同时得到三个基因分别与联接蛋白1基因钙离子电压门控通道基因，人5号染色体CTD一2335024基因有100%同源性。