结直肠癌(Colorectal Cancer：CRC)是常见的消化道肿瘤之一,为全球最常见的三大恶性肿瘤之一(另两种为肺癌和乳腺癌)。2007年全球新发病例估计达120万,并仍以每年3.9%的趋势上升。我国属于结直肠癌低发区,但近年来随着生活水平的提高和生活方式的改变,结直肠癌发病率和死亡率呈明显上升趋势,已超过美国等发达国家,不仅严重威胁到我国居民的生命健康,还加重了社会负担。结直肠癌已成为全球关注的公共卫生问题。结直肠癌的早期治疗效果较明显,因此进一步研究结直肠癌发病机制,提高筛查技术,早期发现癌变并给予治疗,对于提高结直肠癌生存率具有十分重要的意义。结直肠癌的发生发展是一个多基因、多步骤、多阶段的复杂过程。在相同的环境中不同个体的疾病易感性是不同的,这表明遗传因素在结直肠癌的发生发展过程中起一定作用。一般认为,癌基因的活化和抑癌基因的失活在基因调控中发挥着重要的作用。已有的研究报道,p53、APC、p16、错配修复基因(hMLHl. hMSH2、hMSH3、hMSH6、hPMS、hPMS2)、TGF-β基因与结直肠癌发生发展密切相关。近年来有研究发现,胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)基因的表达也可能与结直肠癌患病风险有关。IGFBP7是胰岛素样生长因子结合蛋白超家族(IGFBPs)中的一员,可通过IGF轴发挥生物学效应。IGFBPs与IGFs结合后,抑制了IGFs与受体的结合,从而调节IGFs抗凋亡、促生长、调节糖代谢与细胞迁移等生物学功能。IGFBP7可通过调节细胞的增生、分化和凋亡参与恶性肿瘤的发生发展过程,但在不同肿瘤中的作用机制可能不同。在乳腺癌、肺癌、胃癌、黑色素瘤和白血病中,IGFBP7在癌组织中表达低于正常组织,而在胰腺癌、胶质瘤等恶性肿瘤中,IGFBP7在肿瘤细胞中高表达,在结直肠癌和前列腺癌中的表达作用尚存在争议。IGFBP7在癌组织中异常表达的机制尚不明确,可能与基因表达调控有关。遗传变异指通过改变核苷酸序列调节基因表达,在基因调控中发挥重要作用,其中研究的比较多的是单核苷酸多态性(SNP)。在NCBI的SNP数据库中,已发现IGFBP7基因上游3000bp到下游3000bp区域内包含199个SNP位点。目前仅有一个研究报道了IGFBP7多态性与头颈部肿瘤(SCCHN)的关系,提示启动子区域的遗传变异可能会影响IGFBP7的表达水平,进而影响肿瘤易感性。而IGFBP7基因多态性与其他恶性肿瘤的关系尚未见报道。本研究采用病例-对照研究方法,借助全基因组关联分析的高通量SNP检测方法,筛查与结直肠癌相关的IGFBP7SNPs位点。希望通过研究阐明IGFBP7基因多态性与结直肠癌的关系,为结直肠癌的筛查和诊断提供新的标志物,为预防、干预结直肠癌提供理论依据。材料与方法研究采用病例-对照研究设计。有925例结直肠癌病例和939例正常对照纳入研究。病例来自浙江大学附属第一医院、邵逸夫医院、台州医院和嘉善肿瘤研究现场。收集病人的年龄、性别等一般人口学特征,在病人知情同意的情况下采集全血或组织样本。正常对照来自代谢综合征萧山现场调查人群数据库,该数据库包含调查对象的年龄、性别等一般情况和肿瘤疾病史等信息,全血样本来自相应标本库。利用试剂盒提取全血或组织基因组DNA,采用基因芯片技术进行全基因组扫描,对IGFBP7基因上的47个TagSNP位点进行检测。采用PLINK软件对对照组的基因型频率进行Har(1y—Weinberg遗传平衡检验。应用SPSS16.0统计软件对数据进行统计分析。病例对照两组间的基因型分布采用卡方检验；以Logistic回归模型校正年龄、性别,估计各SNP位点与结直肠癌发病风险的关系及95%可信区间。以筛选出的有统计学意义的TagSNP位点的基因型分布为自变量,以结直肠癌是否发病为应变量,在控制年龄、性别的基础上,采用多因素Logistic回归模型分析阳性位点的交互作用和联合作用。采用Haploview软件检验连锁不平衡,以R软件分析单倍型在两组间的分布。全部结果以p<0.05表示差异有统计学意义。结果芯片所检测的IGFBP7基因的47个位点中,rs1277308C>T突变、rs11133472的G>A突变、rs7656865的T>C突变、rs1718848的G>A突变和rs1277311的T>C突变和结直肠癌的患病风险有关(p=0.045,p=0.011,p=0.047,p=0.029和p=0.030)。与这些位点的野生纯合基因型相比,rs11133472突变基因型AG、rs7656865突变基因型CT和rs1718848突变基因型AG可增加结直肠癌患病风险(OR=2.39,OR=2.11,和OR=2.37)。而rs1277308的TT／CT基因型和CC基因型相比,rs1277311的杂合基因型CT与其他纯合基因型相比,可降低结直肠癌患病风险(OR=0.83,OR=0.81)。rs11133472、rs7656865和rs1718848这三个SNP位点之间不存在交互作用,但存在联合作用。rs11133472和rs1718848两个位点携带突变等位基因A的个体结直肠癌患病风险的联合作用OR值为2.43(95%CI=1.29-4.57)；rs11133472和rs7656865联合作用时,携带突变等位基因A／C的个体结直肠癌患病风险OR值为2.44(95%CI=1.27-4.68)；rs1718848和rs7656865位点携带突变等位基因A／C的个体结直肠癌患病风险联合作用OR值为2.57(95%CI=1.29-5.16)。rs1277308和rs1277311之间也存在联合作用。同时携带rs1277308TT／CT基因型和rs1277311CT基因型的个体与非携带者相比,结直肠癌患病风险OR=0.68(95%CI=0.52-0.89),与只携带一种保护基因型相比,OR值降低。IGFBP7基因的47个SNP位点可分为9个单倍域,在第7个单倍域,四种单倍型在病例对照组间的整体分布存在差异(p=0.036),但是各单倍型之问两两比较时,没有观察到统计学差异。结论本研究中筛选出5个与结直肠癌相关的IGFBP7多态性位点。其中rs11133472AG、rs7656865CT和rs1718848AG基因型可使结直肠癌患病风险增加约2倍。这3个位点两两联合作用时,患病风险进一步增加。而rs1277308TT／CT基因型和rs1277311CT基因型可降低结直肠癌患病风险。这5个多态性位点可能可以作为结直肠癌遗传易感性的生物标志物。