南疆八个葡萄品种(系)形态学及RAPD亲缘关系分析

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本研究首先对南疆(以阿克苏地区为采样点)的部分葡萄品种(系)的主要形态学特征进行了观测研究。其次,本试验是在建立和优化葡萄RAPD反应体系的基础上,采用RAPD分子标记技术,对9份葡萄品种(系)进行了研究,在分子水平上为葡萄种质资源鉴定和品种(系)亲缘关系分析提供了依据。主要研究结果如下:形态学特征分析结果显示:叶片形态结构较为稳定,可以反映各品种(系)叶片的特征,如红木纳格、白木纳格叶片特征描述码均为146-1-92,(即Galet法的ABC-r-S’S法) ,他们为同一品种的不同系,在叶形特征结构上无差异,与实际相符。综合各品种(系)形态学特征指标,绘制出供试品种(系)的聚类图,聚类结果能将白木纳格与红木纳格聚在一起,且将马奶子与温宿红也聚在了一起,说明各品种(系)内的聚类与事实不尽相同。还需借助其它手段进行鉴别,例如,利用RAPD扩增技术对上述葡萄品种(系)进行正确的分类。通过采用改良的CTAB、SDS和高盐法三种提取葡萄基因组DNA的方法,分别对其进行紫外吸收检测、电泳检测和RAPD检测,结果表明:改良的CTAB法提取步骤简单,可得到大量高纯度的基因组DNA,是适合新疆葡萄基因组DNA提取的最佳方法。同时,建立了适合葡萄RAPD反应的最佳PCR体系:20μl反应体系中含模板DNA 100 ng,10×PCR buffer2.0μl,MgCl2 2.0 mmol/L,dNTPs 0.1 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U,引物0.3μmol/L。应用NTSYS软件计算相似系数介于0.55~0.85,并应用UPGMA法将9份供试材料在0.73处分成4个类群,进而分析了各品种(系)间的亲缘关系,为应用RAPD分子标记对葡萄资源进行分类等方面的研究奠定了基础。分别用形态法和RAPD法对供试葡萄品种(系)进行聚类分析,结果表明,所测得的特征指标与形态学分类聚类分析结果有很大关联度。使用RAPD分子标记的方法可将不同葡萄品种(系)区分开。
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