与啮齿类动物相比,猕猴(Macaca mulatta)在遗传和生理上与人类更接近,因此猕猴胚胎干细胞具有重要的研究价值,不仅是研究发育生物学基础理论的良好材料,而且可为细胞替代性治疗提供很好的同种异体移植模型。猕猴胚胎干细胞常规培养于小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)上,这极大地限制了对猕猴胚胎干细胞的研究和应用,因此,需要建立猕猴胚胎干细胞的无饲养层培养体系。　　 本文以猕猴胚胎干细胞系IVF3.2(本实验室自主分离建系,来源于猕猴体外受精胚胎)为研究对象,研究了在以Matrigel(growth factor reduced,BD)作为胞外基质,以MEF条件培养基为培养基,以trypsin消化传代的无饲养层培养体系中,猕猴胚胎干细胞的生长及分化能力,并比较了猕猴胚胎干细胞IVF3.2在无饲养层和有饲养层两种不同培养条件下的细胞周期分布及冻存复苏效率。主要结论如下:1)经过鉴定,在本研究建立的无饲养层培养体系中,猕猴胚胎干细胞IVF3.2能够保持胚胎干细胞的两个基本特征,即分化的多能性和自我更新的无限增殖能力；2)两种培养体系下的IVF3.2的细胞周期分布没有显著差异,均具有胚胎干细胞独特的细胞周期结构之一,即大部分细胞处于S期(>50％的细胞)；3)无饲养层培养的IVF3.2冻存后能高效复苏,采用常规慢速冷冻法冻存无饲养层培养的IVF3.2,复苏后的细胞存活率高达83％,明显高于常规培养的IVF3.2的冻存效率。