家蚕iap基因的克隆及其抑制细胞凋亡的作用

来源 :江苏大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuchen112
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞凋亡(apoptosis)是指在基因控制下的细胞主动死亡,亦称为程序性细胞死亡(programmed、cell death,PCD)。lAPs为近年来发现.的新一类细胞内凋亡抑制蛋白,在许多物种中广泛存在,是细胞凋亡分子调节机制中非常重要而且保守的蛋白家族。目前,已有两类杆状病毒IAP,七类哺乳类IAP,三类节肢动物IAP和果蝇IAP被陆续发现。但是对于家蚕IAP的研究很少。 根据家蚕iap基因序列设计特异引物,采用RT-PCR方法扩增iap基因,将扩增后iap基因片段连接到pUC18载体上,进行测序分析。结果表明该基因读码框大小为1041 bp,编码346个氨基酸。 构建了原核表达载体pET28a-iap,通过。IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和。Western Blotting检测,检测到一条分子量约为38.8 kD的特异表达条带,与表达产物的理论值相符。该蛋白在大肠杆菌中表达量较高。 采用紫外线刺激家蚕幼虫和家蚕细胞,利用荧光定量PCR技术测定在不同剂量的紫外线刺激下iap基因的表达量变化,结果表明一方面iap基因的表达量随刺激剂量增加而上升,过量后又下降;另一方面iap基因表达的应激性是早期的。 利用杆状病毒表达系统,将重组病毒r-iap感染Bm细胞,通过细胞形态观察,结合台盼蓝染色计数法计算细胞的存活率研究细胞的凋亡。结果初步表明,家蚕IAP起到延长宿主细胞寿命和生活周期的作用。将鉴定正确的pCDNA3.1-gfp-iap转染到高等哺乳动物细胞COS-7并进行了表达,为研究iap基因在神经细胞中的作用治疗神经性疾病做初步探讨。
其他文献
无线传感器网络是由低成本,低功率,尺寸小并且能短距离通信的微型传感器节点通过自组织方式形成的网络。无线传感器网络(WSN)作为未来新兴技术之一,它的发展和广泛应用,将对人们
植酸酶能降解植物性饲料中的植酸盐类,释放无机磷,对于提高饲料中磷的利用率,减轻畜禽高磷排泄物对环境的污染以及促进单胃动物对饲料中矿物质营养的吸收利用有重要作用,因此植酸
面对高速光谱仪的分辨率高和精度高问题,需要对高速光谱仪数据进行大容量采集和存储,数据采集技术是信息领域中的一个重要方面,同传感器技术、信号处理技术、计算机技术一起
作为当前声信号传输领域的热点课题,声波人工结构介质的实现和应用正受到广泛关注。声波人工结构介质是一种具有天然媒质所不具备的超常声信号传输特性的人工复合结构或复合媒
正交频分复用OFDM技术具有频带利用率高、抗衰落性能强、数据传输速率快等优势,成为未来移动通信系统的物理层核心技术。对于多址接入,即多用户服务,如何分配子载波、选择调制方
随着网络的快速发展,网络安全问题出人意料得增长,面对这些新形式下安全威胁的攻击多样化和融合的特点,传统的防火墙、入侵检测系统/入侵防护系统及防病毒等单一功能安全产品已
CMMB(China Mobile MultiMedia Broadcast),即中国移动多媒体广播,是我国自主研发的移动多媒体广播标准。2008年借着奥运的东风商用化,可以为用户提供移动电视广播、交互数据等
以ASON为代表的下一代光网络向着大规模、复杂拓扑、面向业务的智能化网络方向发展。为保证网络的可扩展性,网络被划分为多个域,各域之间只交换汇聚后的拓扑信息。因此,如何在缺
网络的迅猛发展为人们快速搜集有效的需求信息提供了便利,然而,信息超载的问题随之产生,面对庞大的网络资源,搜索成为人们寻找信息的首选途径。传统的搜索方式“千人一面”,缺乏对
随着现代通信技术的飞速发展。Ad Hoc网络也成为当今无线通信网络的热点之一。Ad Hoc网络是一种无中心控制设施、分布式的无线网络。由于它的自组织、不需要基础设施支持等突