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目的：间充质干细胞具有自我复制、高度增殖和多向分化的能力，在组织与器官的修复再生方面有重要的作用。牙龈组织具有很强的组织愈合能力，取材容易、方便，并且愈合后无疤痕形成。牙龈组织中也存在着间充质干细胞，和其他间充质干细胞一样，具有基本的干细胞特性，并且具有免疫调节功能。本课题旨在体外研究碱性成纤维生长因子对牙龈间充质干细胞生物学特性的影响，为组织再生提供合适的种子细胞和细胞生长因子。 方法： 第一部分 GMSC的分离培养和鉴定 1、GMSC的分离培养：在家长知情同意下，取临床中全身健康的接受冠延长手术患者，术中切去的牙龈组织，采用酶消化法进行分离、培养。 2、GMSC的鉴定：通过检测GMSC的克隆形成能力、多向分化潜能（成骨分化能力、成脂分化能力）、间充质干细胞表面标记物（STRO-1、CD146、CD90、CD105、CD45、CD34），对分离、培养的GMSC进行鉴定。 第二部分 bFGF对GMSC生物学特性的影响 1、GMSC的分离培养鉴定：在家长知情同意下，取临床中全身健康的接受冠延长手术患者，术中切去的牙龈组织，采用酶消化法进行分离、培养。通过检测GMSC的克隆形成能力、多向分化潜能（成骨分化能力、成脂分化能力）、间充质干细胞表面标记物（STRO-1、CD146、CD90、CD105、CD45、CD34），对分离、培养的GMSC进行鉴定。 2、bFGF对GMSC生物学特性的影响的研究：通过绘制生长曲线、CCK-8法研究bFGF对GMSC增殖能力的影响。流式细胞术检测bF GF对GMSC表达S TRO-1的影响。成骨诱导后通过检测磷酸酶活性、茜素红染色及钙离子浓度测定、Rea l Time RT-PCR在mRNA水平检测成骨分化相关基因BSP、OCN、ALP的表达，研究bFGF对GMSC成骨分化能力的影响。成脂诱导后通过油红O染色、Real Time RT-PCR在mRNA水平检测成脂分化相关基因LPL、PPARG的表达，研究bFGF对GMSC的成脂分化能力的影响。 结果： 第一部分 GMSC的分离培养和鉴定 1、GMSC的分离培养：从人牙龈组织中分离出的细胞贴壁生长，细胞成梭形，部分区域形成克隆。 2、GMSC的鉴定：GMSC具有克隆形成能力，成骨分化、成脂分化等多向分化潜能，表达间充质干细胞特异性表面标记物，S TRO-1、CD146、CD90、CD105，不表达内皮及造血干细胞的表面标记物CD45、CD34，表明细胞具有间充质干细胞的特征。 第二部分 bFGF对GMSC生物学特性影响的研究 1、GMSC的分离培养鉴定：同上 2、bFGF对GMSC生物学特性影响的研究：细胞生长曲线及CCK-8结果显示bFGF促进 GMSC的增殖能力，差异具有统计学意义。碱性磷酸酶活性、茜素红染色、钙离子定量分析、Real Time RT-PCR结果显示bFGF抑制了GMSC的成骨分化能力。油红O染色、Real Time RT-PCR结果显示bFGF促进GMSC的成脂分化能力。流式细胞术检测结果显示bFGF促进GMSC干细胞特异性表面标记物STRO-1的表达。 结论：在一定的培养条件下，bFGF增加 GMSCs干细胞表面标志物的表达，促进GMSCs的增殖能力和多向分化能力，bFGF可以作为一个候选的细胞因子用于组织再生工程。