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远隔效应(Abscopal Effect)是指局部肿瘤经过放射治疗后,非照射区域内的肿瘤出现了瘤体缩小甚至消失的临床现象,多项研究揭示大分割放疗(Hypofractionated Tadiation Therapy,H-RT)相较传统放疗能促进肿瘤细胞的免疫源性死亡(Immunogenic Cell Death,ICD),导致抗肿瘤免疫反应的发生。同时肿瘤免疫微环境(Tumor Microenvironment,TME)等理论提出,抗肿瘤免疫效应还与微环境中多种具有免疫调节功能的膜蛋白及细胞炎性因子相关,例如PDL-1/PD-1、CTLA-4、IL-10、TNF,因而TME逐步被视为抗肿瘤免疫靶点的重要研究方向。环磷酰胺(cyclophosephamide,CYC)作为传统化疗药物临床应用非常普遍,近年来发现低剂量环磷酰胺(Low Dose cyclophosephamide,LD-CYC)对Tregs具有特异性杀死作用,具有潜在的联合治疗基础。本论文基于上述研究结果,使用低剂量环磷酰胺联合PDL-1单克隆抗体(anti-PDL-1)及大分割放疗,以C57小鼠为模型,探索低剂量环磷酰胺是否能够促进远隔效应的发生率及其潜在的免疫学机制。研究假设低剂量环磷酰胺联合PDL-1单克隆抗体及单次大分割放疗能进一步提高远隔效应的发生率。方法:首先利用鼠源性黑色素瘤细胞(B16)建立小鼠(C57)的双肿瘤模型,并记录肿瘤的生长曲线、小鼠的生存期,同时运用流式细胞检仪检测小鼠的外周血液、脾脏、肿瘤等组织中CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、Tregs的含量,并计算CD8~+T细胞/CD4~+T细胞的比值和Treg细胞/CD4~+T细胞的比值来探究实验组和对照组的抗肿瘤免疫的潜在机制。研究也利用HE染色病理切片及免疫组化来辅助判断相关研究结果。结果:100mg是LD-CYC是联合治疗的合适剂量,联合治疗组相较对照组能进一步延长小鼠的生存期并抑制肿瘤的生长(P<0.05),LD-CYC+anti-PDL-1+RT组和anti-PDL-1+RT相比较,能提高远隔效应的发生率,且两者的肿瘤和脾脏组织中CD8~+T细胞/CD4~+T细胞比值有明显差异(p<0.05)。LD-CYC+anti-PDL-1+RT组和LD-CYC+anti-PDL-1+RT+LD-CYC相比较,肿瘤和脾脏组织中CD8~+T细胞/CD4+T细胞结果显示p<0.05,两者具有统计学差异。该研究显示LD-CYC能有效提高抗肿瘤免疫,且重复运用LD-CYC能进一步提高抗肿瘤免疫。结论:本研究明确了低剂量环磷酰胺的合适剂量,并且在该基础上证实了低剂量环磷酰胺能进一步抑制肿瘤的生长并提高远隔效应的发生率,且重复运用环磷酰胺尽管不能进一步提高远隔效应的发生率,但是可以局部肿瘤坏死率并延长小鼠的生存期,但是由于研究的条件限制,多次大剂量的放射治疗能不能取得更好的治疗效果,还需要进一步的验证。