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空肠上皮是空肠与外部环境直接接触的选择性屏障,在营养物质吸收消化和抵御病菌等病原体的入侵方面发挥着至关重要的作用。低蛋白平衡日粮能在不影响断乳仔猪的生长性能的前提下改善腹泻的发生率和严重程度,仔猪的腹泻主要因为一是空肠的发育尚未完善,而是日粮的蛋白质的消化吸收不完全造成,且蛋白质消化吸收的主要场所是空肠。然而,低蛋白日粮对断乳仔猪的空肠上皮细胞的蛋白质代谢的影响尚待研究。因此,本文以10kg的断乳仔猪为研究对象,通过分级分离空肠隐窝-绒毛轴不同分化程度上皮细胞,结合氨基酸检测、PCR等技术分析不同粗蛋白水平日粮对仔猪空肠隐窝-绒毛轴细胞的游离氨基酸、氨基酸转运载体、mTOR信号通路和泛素-蛋白酶体降解通路的影响。本试验选择10kg左右杜×长×大三元杂交仔猪54头,随机分为3组,每组18头,单栏饲养,每个重复1头猪,预饲3d,试验期45d,日粮蛋白水平为14%、17%和20%,分别于第10d、第25d和第45d每组选6头分离空肠隐窝-绒毛轴不同分化程度上皮细胞。结果表明：1)不同蛋白质水平日粮对空肠不同分化程度细胞的游离氨基酸的含量均有不同的显著影响。饲喂10d时,17%粗蛋白水平日粮显著提高了F1的各种类型的游离氨基酸的含量(P<0.05)；饲喂25d时,14%粗蛋白水平日粮显著提高了F’1的各种类型的游离氨基酸的含量(P<0.05)；而饲喂45d时,14%粗蛋白水平日粮显著提高了F"1的各种类型的游离氨基酸的含量(P<0.05)。2)不同蛋白质水平日粮对断乳仔猪不同时期的空肠不同分化程度细胞的影响均不一致,其中,饲喂不同粗蛋白水平日粮10d时,17%粗蛋白水平日粮显著增加了F1和F2的中性氨基酸载体的mRNA的表达量(P<0.05)；饲喂25d时,14%粗蛋白水平日粮显著增加了空肠中性氨基酸转运载体和碱性氨基酸转运载体的mRNA的表达量(P<0.05)；饲喂45d时,14%粗蛋白水平日粮显著增加了肠上皮细胞膜上的ATP酶的mRNA的表达量(P<0.05)。3)不同蛋白质水平日粮对断乳仔猪不同时期的空肠不同分化程度细胞的mTOR信号通路和泛素-蛋白酶体途径的影响均不一致。mTOR信号通路,饲喂10d时,对空肠三个部位的细胞均无显著差异(P>0.05)；饲喂25d时,14%粗蛋白水平日粮显著提高了绒毛上的HIF1α和EIF-4E-BP1的mRNA的表达量(P<0.05),17%粗蛋白水平显著降低了隐窝细胞的HIF1α和p70S6K的mRNA的表达量(P<0.05)；饲喂45d时,17%粗蛋白水平日粮显著提高了绒毛中端HIFlα的mRNA的表达量(P<0.05)。泛素-蛋白酶体途径,饲喂10d时,对空肠三个部位的细胞均无显著差异(P>0.05)；饲喂25d时,14%粗蛋白水平日粮显著提高了绒毛顶端E1和E2的mRNA的表达量(P<0.05),17%粗蛋白水平日粮显著降低了隐窝细胞E2的mRNA的表达量(P<0.05)；饲喂45d时,14%粗蛋白水平日粮显著降低了绒毛顶端E2的mRNA的表达量而20%粗蛋白水平显著降低了E2的mRNA的表达量(P<0.05),17%粗蛋白水平日粮显著降低了绒毛中端E1和E2的mRNA的表达量(P<0.05)。结论：在断乳初期,应适当降低日粮中粗蛋白水平,让仔猪更好的从哺乳期过渡到采食固体期,而在断乳中期后期,可继续降低日粮的粗蛋白水平,达到节省蛋白来源的原料,缓解蛋白原料的紧缺。