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目的:课题组前期通过发泡法和控制烧结温度得到的具有不同表面微结构的β-TCP材料,测定其表面粗糙度参数,探讨材料表面粗糙度对破骨细胞整合素信号通路中相关标志物表达水平的影响。方法:1、SEM电镜下观察制备材料的微观表面形貌。2、AFM原子力显微镜下扫描材料表面微结构,并利用NanoScopeAnalysis1.5软件计算得到材料表面Ra值、Rq值及Rmax值。3、破骨细胞的培养:小鼠RAW264.7细胞系在50ng/ml RANKL诱导下分化为破骨细胞,TRAP染色鉴定为破骨细胞。4、RAW264.7细胞与不同表面粗糙度的TCP材料共培养,并以塑料培养板为空白对照,加入50ng/ml RANKL诱导破骨分化,利用q-PCR技术检测各组在共培养7天后TRAP、ITGαV、ITGβ3、Pyk2、p130cas的表达水平。结果:1、SEM实验:扫描电镜下观察TCP1表面光滑孔隙小;TCP2孔隙略大,表面较为粗糙;TCP3孔隙最大,表面粗糙,可见大小不一的圆孔结构。2、AFM实验:原子力显微镜下结果显示TCP1表面光滑,TCP2表面较粗糙,TCP3的表面很粗糙,各组材料测定的Ra值分别为32.3nm、87.2nm、138nm;Rq值分别为39.9nm、116nm、175nm;Rmax值分别是260nm、1211nm、1292nm。3、RAW264.7细胞培养及破骨分化鉴定:在50ng/ml RANKL诱导下,通过TRAP染色观察到培养的第4天即可见到破骨细胞形成,在培养的第7天破骨细胞分化达到高峰期。4、共培养第7天TRAP的表达:共培养第7天后,TRAP的表达水平在TCP1与TCP2组之间、TCP3与空白对照组之间无明显差异(P>0.05),在TCP1组与TCP2组的表达水平低于TCP3与空白对照组(P<0.05)。5、共培养第7天ITGαV的表达:在粗糙度不同的三种TCP材料中,ITGαV的表达水平不同,表面粗糙的TCP3材料中表达水平比略粗糙的TCP2高,TCP2比光滑的TCP1高,且均高于空白对照组,三组材料之间有显著差异(P<0.05)。6、共培养第7天ITGβ3的表达:TCP2及TCP3组中,ITGβ3的表达水平明显高于TCP1组及空白对照组(P<0.05),而TCP2与TCP3之间、TCP1与空白对照组之间无明显差异(P>0.05)。7、共培养第7天Pyk2的表达:TCP材料组Pyk2表达水平均低于空白对照组,且各组TCP材料之间的表达水平有显著性差异,Pyk2的表达水平在TCP3组最高,在TCP1组最低,TCP2的表达水平在TCP3与TCP1之间(P<0.05)。8、共培养第7天p130cas的表达:TCP组材料的表达水平低于空白对照组,且各组间的表达有差异,在粗糙表面的TCP3材料组,p130cas表达最高,TCP2次之,在光滑的TCP1组表达最低(P<0.05)。结论:课题组制备的不同规格的TCP材料通过进一步检测,具有明显不同的表面特征,并显示材料表面粗糙度影响破骨细胞的分化以及整合素信号通路上相关因子的表达,在一定范围内,材料表面越粗糙Ra值越大,TRAP、ITGαV、ITGβ3、Pyk2、p130cas的表达水平越高,整合素αVβ3-Pyk2-p130cas通路被促进。具有不同表面微结构的TCP材料可以通过影响整合素信号通路调控破骨细胞活性,并有可能进一步影响材料的吸收以及骨重塑与骨完全再生的过程。