巴西蕉对香蕉枯萎病菌1号和4号生理小种抗性差异的研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:loveF
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
香蕉(Musa spp.)是世界范围内重要的水果作物,和其他作物一样,香蕉的种植也受很多因素的限制,其中由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)侵染引起的香蕉枯萎病是香蕉生产上最主要的限制因素。最初,由香蕉枯萎病菌1号生理小种(Foc1)侵染引起的香蕉枯萎病几乎导致‘大蜜哈’香蕉的毁灭,随着抗病品种的不断发现和推广才使得香蕉产业得以复苏。然而,上世纪中期,由4号生理小种(Foc4)侵染引起的香蕉枯萎病的出现和蔓延,再一次打破了香蕉产业的这种局面,从而面临更大的挑战。先前的研究表明,Foc1和Foc4都可以侵染Cavendish香蕉品种‘巴西蕉’,但‘巴西蕉’表现为抗Foc1而感Foc4。然而,为什么会产生这种抗性差异至今还不清楚。为了明确‘巴西蕉’对Foc1和Foc4产生抗性差异的原因,本研究利用带GFP的Foc1和Foc4分别侵染‘巴西蕉’,借助激光扫描共聚焦显微镜来观察比较两个病原菌接种后不同时间点在‘巴西蕉’不同部位的侵染情况,然后选择接种后48 h的‘巴西蕉’根系样品进行了基于TMT的定量蛋白质组学测定以及基于Illumina高通量测序平台的转录组的测序,并对蛋白质组和转录组测序得到的差异蛋白和差异基因的表达进行关联分析,共筛选出了16类潜在的植物抗病相关蛋白/基因,最后从中选择了四个基因进行了初步的功能研究。主要研究结果如下:1.通过病原菌侵染后的组织学观察发现,尽管Foc1和Foc4都可以侵染‘巴西蕉’,但是二者在侵染速率、菌丝的富集量、扩展范围以及侵染寄主植物后产生镰刀菌酸(FA)的量上存在明显的差异。Foc1仅能够从根部扩展至球茎,且球茎中病原菌的生物量要显著低于Foc4侵染后球茎中病原菌的生物量。而Foc4能够从其根部扩展至球茎,再到假茎,最后到叶鞘以及叶片中。2.通过基于TMT的定量蛋白质学分析,总共鉴定到了7325个蛋白,以p≤0.05,Fold Change≥1.2为阈值进行差异表达蛋白筛选,在Foc1接种后,与对照相比,共有689个蛋白差异表达,其中463个上调,226个下调;在Foc4接种后,与对照相比,有744个蛋白差异表达,其中450个上调,294个下调表达;有趣的是,与Foc4接种相比,Foc1接种后总共有1222个蛋白差异表达,其中659个上调,563个下调。RTq PCR和PRM靶向验证结果与蛋白质组学定量结果一致。生物信息学分析表明,氧化还原平衡、病程相关蛋白、植物细胞壁修饰、植物激素与信号转导、模式识别受体、植物次生代谢产物、翻译后修饰以及程序性细胞死亡等相关蛋白参与‘巴西蕉’对Foc的侵染响应。但这些蛋白在Foc1和Foc4侵染后的表达模式不同,这可能与‘巴西蕉’对两个小种的防御机制差异有关。3.通过对同一批样品进行比较转录组学分析,证实了Foc1和Foc4侵染‘巴西蕉’根系早期阶段的基因表达和通路的变化,分别在Foc1和Foc4接种后48 h的‘巴西蕉’根部鉴定到了1862和226个差异表达基因。Foc1侵染早期阶段能够引起黄酮类化合物和木质素合成途径增强,硫代葡萄糖苷类、萜类和生物碱类物质积累,许多激素和受体激酶相关基因表达,而Foc4侵染后对这些通路和基因的表达几乎不受影响或者影响较小。此外,参与生物应激相关通路的差异表达基因在Foc1和Foc4侵染后也明显不同。进一步的分析表明,参与细胞壁代谢和苯丙烷代谢的基因也差异表达。4.将定量蛋白质组数据和转录组数据进行关联分析发现,在三个比较组中,有关联的差异基因数分别为108,14和146个,两组学水平的关联系数分别为0.211,0.152和0.263。生物信息学分析发现,Foc1 vs.CK比较组中参与苯丙烷类生物合成、类黄酮生物合成、谷胱甘肽代谢和植物与病原物互作等与植物抗病性相关的通路中的基因在转录和蛋白层面均上调表达,这可能与‘巴西蕉’对Foc1的高度抗性相关;而Foc4vs.CK比较组中有关联的基因大都和热激蛋白和60S核糖体蛋白相关,其中有5个关联基因无pathway注释,且在转录和蛋白层面均下调表达,这可能与‘巴西蕉’易感Foc4相关。5.初步确定四个候选基因与‘巴西蕉’对Foc1和Foc4的抗性差异相关。本文克隆了四个基因的编码区序列,对其序列进行了生物信息学分析,构建了相应的植物表达载体,观察了其编码蛋白的亚细胞定位,并通过瞬时表达烟草展开了一系列的抗病性实验,结果表明,这四个候选基因可能在‘巴西蕉’对Foc1和Foc4的抗性差异中起作用。本研究为后续香蕉抗性育种提供了理论依据。
其他文献
南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)隶属呼肠孤病毒科(Reoviridae)斐济病毒属(Fijivirus),该病毒由迁飞性害虫白背飞虱以持久增殖型方式传播;近年来,由SRBSDV引发的水稻矮缩病给中国南部、越南、日本等地的水稻造成了极大危害。水稻锯齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus,RRS
学位
荔枝(Litchi chinensis Sonn.),是我国著名的岭南水果之一。由于荔枝果实发育期正值高温多雨季节,给病害的侵染创造了有利条件,病害的发生已成为影响荔枝产量和质量的重要因素。病原的准确鉴定是病害防控的前提和基础。然而,有关我国荔枝病原真菌的鉴定多是依据传统的形态学鉴定方法,而形态易受环境因素影响而变化,可能导致病原种类鉴定上的混乱,不利于荔枝病害的防治与监测、进出口检疫和抗病育种等
学位
芥蓝(Brassica oleracea var.chinensis Lei)隶属于十字花科芸薹属,是中国华南地区重要的经济蔬菜作物。然而芥蓝的耐热性较差,限制了芥蓝的栽培季节和区域。因此,提高芥蓝的耐热性具有重要的理论意义和经济价值。用传统育种方法选育耐热芥蓝材料的效率比较低,而利用基因工程方法导入耐热相关基因则表现出了较高的效率与良好的应用前景。MBF1c(Multi-protein Brid
学位
茶白星病(Tea white scab disease)是我国高海拔茶区常发真菌病害,近年发生面积及其为害程度呈上升趋势,对我国茶产业发展构成重大威胁。目前对于该病的病原、发生规律和致病机理等均缺乏系统研究。本研究对我国茶白星病进行病原鉴定及病菌生物学特性测定,进而对茶白星病引致的茶叶细胞结构、生理生化、转录组及叶际微生物群落的变化进行了系统研究。主要结果如下:1.鉴定了中国南部茶区茶白星病的病原
学位
由甘蔗鞭黑粉菌(Sporisorium scitamineum)引起的甘蔗鞭黑穗病是世界性重要病害,造成甘蔗产量质量严重损失。开展该病菌有性配合与致病相关基因的分离与功能鉴定,可为从分子水平上深入了解甘蔗鞭黑粉菌的致病机制及病菌与甘蔗的相互作用提供依据,对寻找新的药物靶标、设计开发新型的杀菌剂和制定新的病害防治策略均具有重要意义。本研究以甘蔗鞭黑粉菌可亲和野生型菌株JG35和JG36为出发菌株,用
学位
虚假拒绝言语行为作为汉语中的一种重要的交际手段,有其存在的特殊意义和语用价值。本文基于奥斯汀的言语行为理论、利奇的礼貌原则、布朗与朗文森的面子保全理论和格赖斯的合作原则等理论依据,探究虚假拒绝言语行为的内涵和特征。笔者将文献研究法和问卷调查法相结合,分析虚假拒绝言语行为的生成机制,指出在跨文化交际及对外汉语教学中如何让留学生快速理解和掌握虚假拒绝这种特殊的言语行为。
期刊
以电视剧对话为语料来源,对汉语表示拒绝时运用“不用”的情况进行了考察。根据语料,拒绝时“不用”可以单用(包括与叹词、称呼语、小句或句子等共现的情况),也可以出现在表示拒绝的陈述句或祈使句中。当出现在句中时,由于共时状态下性质不同,“不用”可作不同解读。同时,依据会话分析已有的研究成果,从会话语篇的角度考察了运用“不用”的拒绝所适用的具体场景。
期刊
丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)是一种重要的植物致病菌,广泛存在于自然环境中,丁香假单胞菌番茄致病变种DC3000(P.syringae pv.tomato DC3000)(Pst DC3000),可在番茄和拟南芥上引起细菌性斑点病。自被分离发现以来,Pst DC3000常作为一个重要的模式菌株,应用在分子植物病理学的研究中,由于它携带了大量的潜在毒性因素,也常应用到一些通
学位
阿果蝇属(Amiota)隶属于双翅目(Diptera),果蝇科(Drosophilidae),冠果蝇亚科(Steganinae),是冠果蝇亚科的四大类群之一;虽然是世界性分布,但76%的已知种分布在亚洲东部地区。该属物种体长在2-5 mm,多亮黑色,颜、肩甲及翅基乳白色,生殖腹板前端细、弧形等,在形态特征上明显区别于其他类群。本研究观察了采自亚洲东部的阿果蝇标本,在准确的物种鉴定基础上,尽可能抽取
学位
泌乳母猪为乳汁的合成与分泌进行大量的代谢,后者需要大量的氧分子,易产生大量氧自由基和部分脂质过氧化物。超营养剂量硒可提高牛和羊产奶量和乳成分,但超营养剂量硒在母猪上未见报道。本文以围产期母猪和猪乳腺上皮细胞为研究对象,采用体内外试验相结合的方法,开展关于饲粮超营养剂量硒对夏季母猪泌乳性能的影响及其机理研究。主要研究内容及结果如下:第一部分:风机-水帘降温和饲粮超营养剂量硒对夏季母猪泌乳性能及乳成分
学位