论文部分内容阅读
目的:通过观察纳米钙补肾中药对去卵巢骨质疏松症模型大鼠海马组织的BMP-4、Smad-6mRNA及蛋白表达的影响,从基因分子水平揭示肾虚骨质疏松症的发病机制及发病过程中纳米钙补肾中药防治作用的分子生物学基础,为临床合理用药提供科学的实验依据。 材料与方法:实验采用切除大鼠双侧卵巢的方法,建立肾虚骨质疏松症大鼠模型。纳米钙补肾中药复方(低、中、高剂量)对实验大鼠防治12周进行反证,以骨疏康颗粒剂、牡蛎钙组作为阳性对照组,并设正常对照组和模型空白组。使用XR-36型双能X线骨密度仪,测定大鼠离体股骨骨密度(BMD);采用生化方法检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和碱性磷酸酶(ALP);用RT-PCR法、Western印迹法检测模型大鼠海马组织中BMP-4、Smad-6mRNA和蛋白表达。 结果:(1)子宫指数比较:模空组大鼠子宫指数明显低于正常组。用药12周后,与模空组比较,补肾中药低、中剂量组,骨疏康及牡蛎钙对照组子宫指数均有所升高,但无显著性差异。(2)股骨BMD比较:模空组股骨BMD值明显低于正常组;各治疗组均可明显提高模型大鼠BMD值,其中补肾中药中、低剂量组效果最佳,但与骨疏康组比较无显著性差异;补肾中药高剂量组与模空组无显著性差异。(3)骨吸收指标—血清TRAP比较:模空组大鼠血清TRAP明显高于正常组;各治疗组均能降低模型大鼠血清TRAP含量,补肾中药低、中剂量组降低最显著,与阳性对照组比较有显著性差异;补肾中药高剂量组与模空组无显著差异。骨形成指标—血清ALP比较:模空组大鼠血清ALP含量明显高于正常组,各治疗组均能降低模型大鼠血清ALP含量,其中补肾中药低、中剂量组最显著,与阳性对照组比较有显著性差异;补肾中药高剂量组与模空组比较无显著性差异。(4)RT-PCR及Western方法检测大鼠海马组织中BMP-4mRNA及蛋白表达:与正常组比较,模空组大鼠海马组织中BMP-4 mRNA及蛋白表达明显增强;与模空组比较,各治疗组均降低;但以补肾中药中剂量组最显著。(5)RT-PCR及Western方法检测大鼠海马组织中Smad-6 mRNA及蛋白表达:与正常组比较,模空组大鼠海马组织中Smad-6mRNA及蛋白表达明显降低;与模空组比较,各治疗组均增强;但以补肾中药中剂量组为佳。 结论:(1)切除成年大鼠双侧卵巢可以成功复制高转换型绝经后骨质疏松症大鼠模型。(2)纳米钙补肾中药能明显提高去卵巢骨质疏松症大鼠股骨BMD值,显著降低模型大鼠血清TRAP及ALP的活性,有效降低因雌激素减少而造成的高转换型骨代谢异常。(3)纳米钙补肾中药能提高去卵巢骨质疏松症大鼠海马组织中BMP-4 mRNA及蛋白表达,降低Smad-6 mRNA及蛋白表达,对以松质骨丢失为主的高转换型骨质疏松症有积极的防治作用。