小黑杨AP1基因的克隆及在烟草和拟南芥中的遗传转化

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:qinjiajign1323770
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AP1基因是花分生组织特征基因,在花器官发育上发挥着重要的作用。本研究中,我们提取小黑杨中与拟南芥AP1基因同源的PsnAP1-1和PsnAP1-2基因。主要结果如下:  通过序列分析,PsnAP1-1基因的开放阅读框为726bp,预测编码241个氨基酸,编码蛋白分子量约为28.1kDa,等电点pI为8.19; PsnAP1-2基因的开放阅读框为750bp,预测编码249个氨基酸,编码蛋白分子量约为28.7kDa,等电点pI为9.07。  Northern blot与实时荧光定量PCR分析显示,PsnAP1-1和PsnAP1-2基因在小黑杨早期的花发育阶段呈高水平表达。亚细胞定位分析显示,PsnAP1-1和PsnAP1-2蛋白只在细胞核中表达。  在CaMV35S启动子调控下,PsnAP1-1和PsnAP1-2基因在烟草中过表达使开花时间明显提前。与野生型烟草相比,转基因植株茎的萌发提前很多,且光合作用效率也较高。  实时荧光定量PCR分析进一步表明,PsnAP1-1和PsnAP1-2基因的过表达导致开花相关基因的上调,例如NtMADS4,NtMADS5和NtMADS11。  PsnAP1-1和PsnAP1-2基因在拟南芥中的过表达也诱导其提前开花,但并未引起拟南芥突变体ap1-10花形态的显著变化。  以上结果表明,PsnAP1-1和PsnAP1-2基因可能在小黑杨的开花转变中发挥着重要作用。
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