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近些年来,随着体外受精(IVF)技术的出现,在体外获得胚胎的技术取得了实质性的发展。体外受精技术不仅应用于畜牧生产,同时,也成为研究其他胚胎生物技术,如克隆、转基因、胚胎干细胞分离培养和性别控制等的重要辅助手段。然而,在猪IVF的过程中,多精受精现象是一个始终无法解决的问题。所以,尽量地降低多精受精的比率,对于获得更多高质量的IVF胚胎来说是相当重要的。而其中,培养液的优化是降低多精受精的比率的重要组成部分。为了优化猪体外受精技术体系,本试验探索了在猪IVF培养体系中,在几个关键的时间点加入不同浓度的甲基-p-环化糊精(MBCD),经过体外受精以及胚胎培养后,来评估其胚胎的发育能力以及体外受精的效率,从而探索甲基-p-环化糊精(MBCD)对猪体外受精的效率以及度随后的胚胎发育的影响。并通过CTC染色的方法来评估精子在含甲基-p-环化糊精(MBCD)的IVF体系中的获能状态。在体外受精前48h、体外受精0h、4h和6h向受精液(modified Tris-buffered medium, mTBM)中添加不同浓度(0μmol/mL、0.5μmol/mL、1μmol/L、2μmol/mL、5μmol/mL、10μmol/mL、15μmol/mL、20μmol/mL)的MBCD,受精孵育结束后转至PZM-3培养液中进行胚胎培养。对各处理组卵母细胞的受精情况以及胚胎发育能力进行了系统的检测,并用金霉素(chlortetracycline,CTC)染色法评估了MBCD处理后精子获能状态。结果显示:体外受精Oh添加5μmol/mL和10μmol/mL MBCD组的卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数显著高于(P<0.05)对照组和除10μmol/mL MBCD组之外的其他试验组;体外受精0h添加5μmol/mL和10μmol/mL MBCD组、单精入卵率显著高于(P<0.05)对照组和其他试验组,而多精入卵率显著低于(P<0.05)对照组和其他试验组;添加5μmol/mL MBCD组,0~1h, F型精子迅速减少(78.56~19.43),B型精子迅速增加(10.79~69.86);1~4h,F型精子和B型精子基本保持不变(B型:69.86~78.78,F型:19.43~9.11)。上述结果表明在体外受精0h向mTBM中加入5μmol/mL或10μmol/mL MBCD可以显著提高获能精子比例,减少多精受精发生,提高早期胚胎发育潜能。