‘桂味’荔枝种胚败育的表现及其机理初探

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhenghao_w
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‘桂味’荔枝以其果实细核、肉质爽脆、清甜、有桂花味闻名。‘桂味’是典型的部分败育品种,同一果穗上有种子正常发育(大核)与败育(焦核)两种果实,焦核率不仅显著影响果实的可食率,对口感也有影响。‘桂味’的焦核率是其果实商品价格的重要决定因素,焦核率在不同果园、同一果园的不同年份有较大的差异,然而,目前对于‘桂味’焦核发生的规律及影响焦核率的因素研究较少。本论文调查不同果园、同一果园不同年份、同一果园不同花期和不同花穗类型以及不同花粉源‘桂味’果实焦核的发生规律。利用半薄切片技术观察荔枝胚珠的早期发育,发现了大核‘桂味’株系,并利用SCoT分子标记对‘桂味’种子表现型不同的株系进行遗传背景差异程度进行鉴定。总结不同花粉源‘桂味’的种胚败育发生规律和模式植物相关的研究进展,形成‘桂味’荔枝种胚败育受表观遗传调控,基因印迹或基因甲基化造成某基因沉默是‘桂味’焦核的主要原因的假设,从荔枝基因组中筛选获得了基因甲基化和去甲基化的相关基因,采用荧光定量PCR方法对荔枝DNA甲基转移酶和DNA糖基化酶进行时空表达分析,并克隆出差异表达的基因。主要研究结果如下:1.‘桂味’荔枝种子发育可分为三种类型:早期败育型、晚期败育型和正常型。不同果园‘桂味’焦核率有较大差异,介于40-97%;同一果园不同年份和不同植株的焦核率也有一定的差异;在同一棵树上,早开花的果实焦核率较低。2.‘桂味’表现出明显的花粉直感现象。不同花粉源对‘桂味’授粉,种子发育有显著的差异。‘桂味’自花授粉所结果实败育率高达93.3%,‘雪怀子’、‘怀枝’、‘红蜜荔’、‘紫娘喜’等花粉授粉所结果实败育率都比‘桂味’自花授粉要低,焦核率介于28.6-65.3%。3.‘桂味’胚珠早期发育明显迟缓,胚乳核明显少于‘怀枝’。‘桂味’花后15天的胚珠相当于‘怀枝’花后10天的胚珠大小,处于原胚期,而‘怀枝’花后15天的合子胚已经启动分裂,处于球形胚早期。4.发现了‘桂味’的大核单株,除种子发育表型外,其余生物学特征与部分败育型‘桂味’一致。利用能区分不同荔枝品种的SCoT分子标记进行遗传多样性分析,未发现特异条带,说明大核型‘桂味’与部分败育型‘桂味’遗传背景高度一致。5.根据‘桂味’荔枝败育的规律,推测其种胚发育受表观遗传调控。在荔枝数据库中筛选出6个DNA甲基转移酶,分别命名为LcMET1、LcMET2、LcCMT1、LcCMT2、LcDRM1、LcDRM2;以及4个DNA糖基化酶,分别命名为LcDML1、LcDML2、LcDML3、LcDML4。通过Real-Time PCR分析这十个基因在胚珠和花粉中的表达水平。发现DNA甲基转移酶在胚珠发育早期表达量高,随着胚珠的发育呈下降趋势。初步筛选出了表达与‘桂味’种胚败育规律较吻合的甲基转移酶基因LcCMT1、LcCMT2和LcDRM2,克隆了基因全长并进行了相关的生物信息学分析。
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