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目的:建立同一病人神经母细胞瘤(NB, neuroblastoma)细胞系来源的不同侵袭能力的细胞株,探讨趋化因子受体CXCR4(趋化因子受体4)的表达水平对神经母细胞瘤细胞株体外侵袭能力的影响。方法:建立同一病人神经母细胞瘤(NB, neuroblastoma)细胞系来源的不同侵袭能力的细胞株,探讨趋化因子受体CXCR4(趋化因子受体4)的表达水平对神经母细胞瘤细胞株体外侵袭能力的影响。结果:成功建立了同一病人神经母细胞瘤(NB, neuroblastoma)细胞系来源的不同侵袭能力的细胞株,CXCR4蛋白在筛选出的细胞株QDDQ-NM a中的表达明显高于细胞株QDDQ-NM e, P<0.01;CXCR4 mRNA在QDDQ-NM a中的表达明显高于细胞株QDDQ-NM e, P<0.01。QDDQ-NM a的体外趋化侵袭能力强于QDDQ-NM e,差异具有显著性统计学意义,P<0.01,其与CXCR4蛋白和CXCR4 mRNA表达水平呈正相关。结论:同一病人神经母细胞瘤细胞系中的细胞具有异质性,同一病人神经母细胞瘤细胞系来源的不同细胞株侵袭能力不同,神经母细胞瘤细胞株高度的体外侵袭能力与CXCR4的高表达呈高度相关性。目的:构建趋化因子受体4(CXCR4)小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,研究其对体外神经母细胞瘤侵袭能力的影响。方法:选择CXCR4高表达的神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系,设计合成人CXCR4基因不同靶点的能编码siRNA的3条双链DNA序列,克隆到真核表达载体pSilencerTM neo中构建siRNA表达载体,体外脂质体介导转染SH-SY5Y细胞,用半定量RT-PCR分析CXCR4基因mRNA的变化,用免疫组织化学和Western blot分析CXCR4蛋白表达,Transwell小室检测细胞的侵袭能力。结果:成功构建了CXCR4-siRNA表达载体,转染后半定量RT-PCR检测神经母细胞瘤细胞CXCR4mRNA丰度分别为siRl转染组0.32±0.09、siR2转染组0.35±0.13和siR3转染组0.33±0.11,相对于对照组0.58±0.13表达下降(P<0.05);转染后免疫组化检测神经母细胞瘤细胞CXCR4的蛋白表达分别为siRl转染组75.98±4.81、siR2转染组75.52±3.95和siR3转染组76.35±6.51,相对于对照组92.196±3.89表达下降(P<0.01);转染后Western blot检测神经母细胞瘤细胞CXCR4的蛋白表达分别为siR1转染组0.1103±0.0023、siR2转染组0.1203±0.0015和siR3转染组0.1308±0.0018,相对于对照组0.4832±0.0012表达下降(P<0.01);且转染后神经母细胞瘤细胞侵袭能力较对照组53.11±3.72降低(P<0.05),siRl转染组为25.48±2.81、siR2转染组为30.89±2.77、siR3转染组为18.83±1.79。结论:CXCR4-siRNA表达载体通过降低CXCR4基因的蛋白表达能显著抑制神经母细胞瘤细胞的体外侵袭能力,有望为神经母细胞瘤的基因治疗开辟新途径。