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目的胰腺癌是目前已知的恶性度最高、预后最差的实体瘤。尽管包括手术和放化疗在内的治疗手段取得了明显的进展,但胰腺癌的预后并未获得明显改善,五年的存活率只有3%左右。乏氧是实体肿瘤普遍的生长微环境,乏氧状态下肿瘤进展较快是临床治疗中所面临的难题。低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor1, HIF-1)是参与肿瘤乏氧的一个重要的调控因子,由α亚单位和β亚单位构成的异源二聚体,转入细胞核内,参与细胞增殖、糖代谢、细胞存活等多种生理功能。临床病理学资料显示,约70%胰腺导管腺癌组织高表达HIF-1。最近研究报道了HIF-1α序列中rs2057482基因多态性影响肾细胞癌的预后,并且通过影响Wnt信号通路参与结肠癌的遗传易感。但其与胰腺癌的关系尚未有人报道。而近年来,HIF-1α在胰腺癌的形成、进展过程中发挥的作用引起了广泛关注,本研究旨在探讨HIF-1α基因多态性和胰腺癌发病预后的关系,以及HIF-1α基因多态性在miRNA调控HIF-1α中的作用,为胰腺癌患者的早期诊断和治疗提供新的途径和靶点。方法1.样本的纳入及采集采用以医院为基础的病例-对照研究方法,以291例胰腺癌患者和247例正常对照为研究对象。病例组为2001年至2012年在天津医科大学附属肿瘤医院住院的经细胞学证实为胰腺癌的患者；对照为同时期在天津医科大学附属肿瘤医院进行体检的247位正常居民。2.目的基因的采集、扩增、测序及免疫组化采集病例和正常对照人群的静脉血及部分病例组石蜡组织,DNA的抽提采用DNA提取试剂盒。应用聚合酶链反应(PCR)和基因测序技术对各样本rs2057482多态位点基因型进行鉴定。并收集150例胰腺癌石蜡组织切片,用免疫组织化学方法分析rs2057482位点基因型分布与HIF-α基因表达的相关性。3.细胞功能学实验验证miR-199a靶序列的3’非翻译区野生型和突变型荧光素酶报告基因载体,与miR-199a mimic/mimic control共转染HEK-293T和胰腺癌细胞系,检测两种载体中荧光素酶的表达差异。4.数据统计研究对象基因型与Hardy-Weinberg平衡的符合程度、组间基因型与等位基因频率的比较采用双侧χ2检验,采用非条件Logistic回归模型对胰腺癌的危险因素进行单因素和多因素分析,估计比值比(OR)及其95%置信区间(CI)。用Kaplan-Meier方法进行生存分析,不同基因型之间生存率差异通过log-rank检验。结果1. HIF-1α基因中rs2057482位点的CC基因型频率病例组显著高于对照组(73.5%vs61.9%,P<0.01)。logistic回归分析结果显示：CC基因型可增加胰腺癌的患病风险(OR=2.156,95%CI：1.324-3.511,P<0.05)。2. Kaplan-Meier生存分析发现124例胰腺癌中CC基因型患者生存时间(14.0±2.1月)明显低于CT基因型患者(25.2±6.3月,P=0.01)。临床病理学分析发现淋巴结转移情况与该SNP位点的改变相关。3.双荧光素酶实验证实miR-199a靶向结合于HIF-1α3’UTR区,且与CC基因型相比,miR-199a显著下调CT基因型的荧光素酶活性(P<0.01)。结论HIF-la基因miR-199a靶序列区基因多态性和胰腺癌易感性和预后密切相关,为胰腺癌患者的早期诊断和治疗提供新的途径和靶点,对胰腺癌患者的预后提供新的指标。