长叶点地梅(Androsace longifolia)组织培养与细胞悬浮培养条件初探

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长叶点地梅(Androsace longifolia)是报春花科点地梅属的一种草本植物,且为多年生花期在5月,其植株较矮小,单朵花虽小,但花色清新,是东北地区难得的早春野生花卉,具有很高的观赏价值,但是目前,对其的研究还很少,鉴于它在园林应用上的前景广阔,有必要通过快繁对其在种质资源保存和新品种开发方面进行探索。本研究以长叶点地梅的种子为外植体,以不同的方法进行消毒处理。利用愈伤组织、不定芽的诱导、丛生芽增殖三种不同途径建立了其植株的再生体系,主要结果如下:1.建立长叶点地梅快繁体系时,其种子的最佳消毒方法为:在装有75%酒精的无菌三角瓶中迅速冲洗30s后,迅速转入无菌水中冲洗3次,再用10%NaCIO消毒12min,再在用无菌水冲洗5次,污染率为5.0%,平均萌发率达66.7%。2.用长叶点地梅的叶片及其下胚轴诱导愈伤组织的过程中,结果表明:下胚轴愈伤诱导的最佳培养基为MS+0.3mg/L6-BA+0.1mg/L NAA,诱导率达85%;叶片愈伤诱导的最佳培养基为:蔗糖浓度3%,琼脂浓度为8.0g/L, MS+1.0mg/L2,4-D+0.2mg/L6-BA,诱导率达83.3%。3.愈伤组织的最佳继代培养条件为暗培养,培养基为MS+0.5mg/L6-BA,其中蔗糖浓度为3%,pH5.4,该条件下,褐化率仅为2.8%。4.叶片愈伤和下胚轴愈伤诱导不定芽的研究表明:叶片愈伤诱导芽的在最佳培养基为MS+0.07mg/L TDZ+0.1mg/L KT,每块愈伤平均分化的芽数为6.3个;下胚轴基部愈伤为诱导芽的最佳愈伤组织,最佳激素比为0.5mg/L6-BA+0.2mg/L KT。不定芽最佳生根培养基为MS+活性炭1g/L+0.8mg/L NAA,成活率92.5%。5.叶片直接诱导不定芽过程中发现:叶片的上、中、下三部分,下部分化能力最强,最佳培养基为:MS+2mg/L6-BA+2mg/L TDZ,在该实验限定的条件下,中、上部未表现出分化能力。丛生芽增殖的最佳培养基为MS+1g/L活性炭)+0.12mg/L TDZ+O.Olmg/L NAA,增殖系数最高达11.9。丛生芽的最佳生根培养基为MS(活性炭1g/L)+1.0mg/LIBA,成活率达70.6%。6.长叶点地梅愈伤组织细胞悬浮培养最佳条件为:蔗糖浓度为2%的MS+0.3mg/L6-BA,摇床转速为105rp/min,采用100ml三角瓶,每瓶培养液50ml时,悬浮体系的细胞最佳起始接种量为2.0g。
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