植物穿心莲(Andrographis paniculata)95%乙醇提取物中的石油醚萃取部分(APPE)具有良好的醌还原酶诱导活性,推测可能是由APPE中的迈克尔反应受体分子(MAAs)引起的。为了快速发现这些MAAs,本文以谷胱甘肽(GSH)作为底物,利用高效液相一质谱联用技术对APPE进行分析。结果表明,有3个化合物能与GSH结合,根据质谱数据推测其结构为andrographoside(穿心莲内酯苷),andrographolide(穿心莲内酯),14-deoxy-14,15-dehydroandrographolide(穿心莲丁素),推测其具有醌还原酶诱导活性。为了进一步确定这些化合物的化学结构和及其生物活性,本文从APPE分离了19个化合物,其中包括穿心莲内酯,以及四个新化合物1,2,10,15。活性分析表明,穿心莲内酯(18)具有较强的醌还原酶诱导活性(CD=1.43,μM),而其它化合物醌还原酶诱导能力很弱。一些迈克尔反应受体分子(MAAs)能够通过与生物体内的一些多巯基蛋白共价结合而表现出特定的生物学活性。化合物18可能是通过烷基化Keap1上的巯基位点引起醌还原酶的诱导。本文利用micrOTOF分析与化合物18作用后的Keap1肽段,发现了四个半胱氨酸(Cys77, Cysl51,Cys273和Cys368)被烷基化。因此,化合物18可能是通过烷基化Keap1的半胱氨酸来引起起醌还原酶的表达。