【摘 要】
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犬腺病毒(Canine adenovirus, CAV)属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属,是哺乳动物腺病毒中致病性最强的一种,分为1 型和2 型。犬1 型腺病毒(CAV-1)可以引起犬传染性肝炎和狐狸、
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犬腺病毒(Canine adenovirus, CAV)属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属,是哺乳动物腺病毒中致病性最强的一种,分为1 型和2 型。犬1 型腺病毒(CAV-1)可以引起犬传染性肝炎和狐狸、熊的脑炎以及单纯的呼吸道疾病;犬2 型腺病毒(CAV-2)引起犬的传染性喉气管炎和肠炎。CAV-1 弱毒疫苗虽然已最大限度致弱,但还会引起眼、肾病变,造成免疫犬发生前眼色素层炎,形成短暂角膜浑浊的“蓝眼病”。由于CAV-2 和CAV-1 具有交叉免疫作用,而且CAV-2 弱毒苗克服了CAV-1 弱毒苗的现有缺点,能激发体液免疫和细胞免疫,可同时保护动物抵抗CAV-1 和CAV-2 的感染。因此目前世界上用于犬腺病毒感染的疫苗都采用CAV-2 弱毒疫苗。腺病毒为载体的重组疫苗能很好的表达外源基因,其表达产物能诱导机体产生高水平的细胞免疫和体液免疫反应,并产生免疫保护。腺病毒因其具有宿主范围广,感染滴度高,安全,稳定以及应用方便等优点而成为研究重组疫苗和人类基因治疗的热点。以人、猪、牛、羊、禽等腺病毒为载体的重组疫苗相继获得成功,如用人5 型腺病毒构建的狂犬病病毒糖蛋白基因重组疫苗用于野生动物狂犬病的免疫,获得了良好的预防效果,但人腺病毒不能在动物体内很好的繁殖,这就影响了重组疫苗的免疫效果,犬科动物对CAV易感且本身就具有免疫原性,插入外源性抗原基因即为二联基因工程苗,可同时对犬和野生动物进行两种疾病的免疫预防。采用犬2 型腺病毒为载体进行重组疫苗的研究很早就引起国内外学者的兴趣,但由于其同源重组效率低、表达调控机制不明等原因,迄今尚无相关报道。本研究进行了绿色荧光蛋白(GFP)与犬2 型腺病毒(CAV-2)基因体外重组的基础研究。一、以分离驯化的CAV-2 弱毒疫苗YCA-18 株为基础,提取全基因组DNA 后
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