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JAK/STAT信号通路是一条多种细胞因子共用的信号传导途径,其相关蛋白及基本功能在生物体中保守。为了鉴定家蚕JAK/STAT信号通路组成原件,在电子克隆的基础上,通过RT-PCR获得家蚕JAK/STAT信号通路的主要相关基因;利用在线软件对相关蛋白进行结构域分析,并预测家蚕JAK/STAT信号通路主要相关基因的功能。通过基于microarray数据库或qPCR分析各基因的组织表达特征。克隆的家蚕JAK/STAT信号通路相关基因主要包括:BmSTAT,BmHOP,BmSOCS2,BmSOCS5A,BmSOCS5B,BmSOCS6,BmDRK,Bmken,BmPIAS1,BmPIAS2以及BmPI3K,但没有能克隆到果蝇Upd1、Upd2和Upd3的同源体基因。序列分析显示BmHOP具CRD_FZ、Kringle、转膜区域和PKc超家族蛋白激酶催化结构域TyrKc;BmSTAT有2种亚型,均具SH2、STAT_bind、STAT_int和STAT_alpha结构域;在克隆的BmSOCS家族的3个基因中,BmSOCS2A和BmSOCS6A具典型的SH2和SOCS结构域;BmDRK由SH3和SH2两种结构域形成了SH3-SH2-SH3串联结构;BmKen存在BTB和锌指结构域,BmPIAS1和BmPIAS2具有LCR结构域,BmPI3K具有两个SH2结构域。相关蛋白的保守结构域分析显示,在家蚕JAK/STAT信号通路中,BmHOP是JAK激酶的一种,可以磷酸化BmSTAT转录因子,激活靶基因转录;BmSOCS、Bmken、BmPIAS1以及BmPIAS2对JAK/STAT通路起负反馈作用。实时定量PCR(Real-Time PCR)结果显示BmSOCS6mRNA丰度在家蚕精巢中最高,血细胞相对较低。用原核表达的重组BmSOCS6制备鼠抗BmSOCS6多克隆抗体,细胞定位结果显示BmSOCS6主要定位在BmN细胞的细胞质;免疫组化结果显示BmSOCS6精巢、卵巢中均有表达,在生精囊和卵巢管也有表达。为了探讨家蚕JAK/STAT途径抗病毒和微孢子虫感染的免疫应答,家蚕感染BmNPV,后,Real-Time PCR检测BmSTAT的转录水平,结果显示,感染48、72h后家蚕血液中BmSTAT转录水平分别提高14、12倍左右;家蚕感染BmCPV、微孢子虫后,中肠后部组织中BmSTAT转录水平与对照无明显差异;家蚕感染BmDNV后,后部中肠中BmSTAT转录水平提高5倍。可以推测家蚕JAK/STAT信号通路能应答BmNPV和BmDNV感染。研究结果对进一步理解家蚕JAK/STAT信号通路的构成、主要相关基因的作用及家蚕抗病毒和微孢子虫应答有重要帮助。