论文部分内容阅读
目的：本课题立足中医基础理论,结合现代医学研究,旨在通过实验研究,探讨补肾促排卵系列方对雄激素致不孕大鼠( ASR)促排卵的可能机制,阐明其促卵泡发育和排卵的干预环节,从而为排卵障碍性不孕症的治疗提供更为开阔的科研思路和临床治疗依据。 方法：本实验选用SD雌性幼鼠,于出生第9日龄注射丙酸睾丸酮制作雄激素致不孕大鼠模型。将实验动物随机分为7组,即序贯高剂量组、序贯低剂量组、补肾填精方高剂量组、补肾填精方低剂量组、枸橼酸氯米芬组、空白对照组及模型对照组。同种饲养条件下,分笼喂养, 每日定时灌胃给药1次。序贯高、低剂量组给药剂量分别为补肾填精方29g/kg(以生药量计)、14.5g/kg,补肾活血方24g/kg、12g/kg,每方连续灌胃3天,交替进行, 6天为一个周期。补肾填精方高、低剂量组给药剂量分别为29g/kg、14.5g/kg。分别相当于临床剂量的6.7倍、3.35倍。枸橼酸氯米芬组给药剂量为5.58mg/kg,相当于临床剂量的6.7倍。各组用药体积均为18ml/kg 。空白对照组、模型对照组给予等量去离子水。均连续给药30天。给药30天后,经阴道细胞涂片观察并挑选处于动情期的大鼠,进行指标测定。酶免法检测大鼠血清胰岛素样生长因子-I ( IGF-I)的含量；取大鼠子宫、卵巢称重,并换算为脏器指数；并用免疫组化法观察卵巢上基质金属蛋白酶-9( MMP-9)的表达情况。 结果：( 1)模型对照组的大鼠体重显著高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。模型对照组的大鼠子宫指数、卵巢指数显著低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。序贯高剂量组的大鼠体重与与模型对照组相比,差别有统计学意义( P<0.05)。补肾填精方高剂量组及枸橼酸氯米芬组的大鼠体重与模型对照组相比,差别均有统计学意义( P<0.01)。序贯高剂量组、补肾填精方高剂量组及枸橼酸氯米芬组均能增加大鼠子宫、卵巢指数,与模型对照组相比,差别均有统计学意义( P<0.01)。( 2)模型对照组的大鼠血清 IGF-I水平高于空白对照组,与空白对照组比较, 差别无统计学意义(P>0.05)；序贯高、低剂量组,补肾填精方高、低剂量组及枸橼酸氯米芬组的大鼠血清 IGF-I水平与模型对照组相比,血清 IGF-I 水平均有降低趋势,但差别均无统计学意义(P>0.05)。( 3)模型对照组的大鼠卵巢局部 MMP-9的表达面积和表达强度均明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。序贯高、低剂量组,补肾填精方高剂量组及枸橼酸氯米芬组的大鼠卵巢局部 MMP-9 的表达面积均高于模型对照组,与模型对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。序贯高剂量组、补肾填精方高剂量组及枸橼酸氯米芬组的大鼠卵巢局部 MMP-9 的表达强度均高于模型对照组,与模型对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。序贯高剂量组的大鼠卵巢局部 MMP-9无论表达面积、表达强度均显著优于单用补肾填精方治疗组,其差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论：中药补肾促排卵系列方通过降低 ASR 大鼠体重,促进子宫、卵巢发育,增强卵巢局部 MMP-9 的表达,并且可能不单是通过改善 ASR 大鼠血清IGF-I水平,而是通过调节整个胰岛素样生长因子系统,促进卵泡发育和排卵。说明补肾促排卵系列方对排卵障碍性不孕症的治疗确有分子水平的理论依据。