近年来发现细胞表面存在一种非释放性的新型囊泡。目前,对该种细胞表面囊泡的组成、结构、产生、运动、命运和功能均知之甚少。细胞的铺展和迁移是两种重要的细胞状态。本论文猜测在不同的细胞状态下细胞表面囊泡的产生和运动规律可能不同。因此,本论文对不同细胞状态下细胞膜表面囊泡进行单囊泡追踪分析。首先,细胞铺展状态下,分别用OxLDL,TNF-α,VEGF和LPS刺激HUVECs后,细胞间粘附分子(ICAM-1)的表达水平都增高,证明这些试剂能刺激细胞的活化;MβCD可以显著剔除HUVECs细胞质膜胆固醇,从而改变细胞质膜的流动性。随后的单囊泡追踪分析发现,OxLDL,TNF-α和VEGF导致细胞表面囊泡的平均数量显著增加,同时显著提高细胞膜的运动速率,但不会显著影响细胞表面囊泡的位移(移动范围)。其次,细胞迁移状态下,分别用Ang-1,OxLDL,TNF-α,VEGF和LPS刺激HUVECs后,细胞中Rho A(Rho GTPase)表达水平增强,且细胞的迁移率显著提高,证明这些试剂能够促进细胞迁移。随后的单囊泡追踪分析发现,OxLDL,TNF-α和Ang-1显著增加了细胞表面囊泡的平均数量,同时,OxLDL,TNF-α,LPS,Ang-1和VEGF可显著提高细胞表面囊泡的运动速率;OxLDL显著扩大了细胞表面囊泡的位移。为了进一步研究细胞骨架与细胞表面囊泡的关系,本论文用Cytochalasin D和Nocodazole分别破坏细胞内的微丝和微管(两种细胞骨架),再进行单囊泡追踪分析。实验发现,在两种细胞状态下,细胞骨架的破坏都能导致细胞表面囊泡数量的显著增加以及囊泡运动速率和运动范围的显著下降。结果表明,细胞表面囊泡的产生和运动规律与细胞骨架有紧密关系。综上所述,细胞表面囊泡的产生和运动可能受到多种细胞状态(比如细胞活化、细胞膜的流动性、铺展和迁移等)的影响,而且可能受到细胞骨架的调控。本研究对于深入了解细胞表面囊泡的产生和运动规律具有重要意义。