光甘草定是光果甘草（Glycyrrhiza glabra L.）中一种特殊的异黄烷类化合物,具有抗氧化等多种药理活性,是一种有效的活性物质。由于光甘草中黄酮类成分丰富,光甘草定的分离存在一定难度;同时其化学稳定性差,在分离与保存过程中均可发生分解。因此,为了减少保存条件与操作因素对光甘草定稳定性的影响,实现其高效、低成本的规模化制备,本课题对光甘草定的检测方法、分离纯化与稳定性影响因素进行研究,并测定了不同极性光甘草提取物的自由基清除活性。采用高效液相色谱（HPLC）分析技术建立光甘草定的检测方法,具体检测条件如下:流动相:甲醇:水:冰醋酸=70:30:0.2%;检测波长:282 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:25℃。采用所建立方法测定光甘草中的光甘草定含量为8.83‰。选择D101大孔树脂分离纯化光甘草定,系统优化D101大孔树脂分离光甘草定的各实验参数,确定最优纯化工艺路线并得到光甘草定纯度可达42.97%的光甘草提取物,收率为67.79%。利用所建立检测方法,跟踪研究了温度、光照、湿度、氧化剂、pH、溶剂以及氧气七项因素对光甘草定稳定性的单独作用与交互作用,检测结果表明,常温下氧气对光甘草定稳定性无显著影响;其余六项因素则与光甘草定稳定性密切相关,其中光照的影响最为显著。制备四种不同极性的光甘草提取物（水提物、丙酮提取物、氯仿提取物、石油醚提取物）,采用分光光度计检测法测定其对O^2-、·OH、NO自由基、HClO、ABTS以及DPPH的清除活性,结果表明氯仿提取物的综合清除率最高。