TLR-9相关因子在急性肺挫伤中的表达及意义

来源 :贵州医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wangxinyu999
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目的:Toll受体9(Toll-like receptors-9,TLR-9)在胸部创伤所致大鼠急性肺挫伤中表达的意义。方法:选取2016年4月~5月购自贵州医科大学动物实验中心的40只健康、雄性SD(Sprague-Dawley,SD)大鼠作为研究对象。利用小型生物撞击机(由第三军医大学予以提供),在500kpa下对大鼠胸部进行撞击,形成重度肺挫伤。参照AIS-90标准,对受伤后大鼠进行评分,大鼠受伤后会出现频繁、深沉的呼吸,较之前更明显,呼吸急促、口唇发钳、苏醒延迟、精神萎靡、食欲减退、活动减少。上述提示:代谢性呼吸增快在大鼠身上已经出现,目的在于适应氧供。因此,采用500kpa撞击较好的模拟了大鼠急性肺挫伤。随机分为5组,每组8只:正常对照组;胸部创伤致急性肺挫伤模拟组(500kpa)撞击后5,24,48,72小时,于股动脉放血处死。取大鼠血清及肺组织。HE染色观察大鼠肺组织病理学改变、肺组织湿/干质量比、采用免疫组织化学法、Elisa法检测血清及肺泡灌洗液中TLR-9受体的蛋白表达水平、予RT-PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)法检测肺组织TLR-9、IL-6(Interleukin-6,IL-6)的mRNA表达水平;Western blot法检测肺组织TLR-9的蛋白水平。结果:肺组织病理学检查显示:与空白对照组比较,胸部创伤组大鼠肺水肿、肺组织充血、中性粒细胞浸润、炎性渗出较明显。免疫组织化学法回示:胸部创伤组大鼠光镜下显色呈明显棕黄色,空白对照组大鼠光镜下未见黄色,其中以胸部创伤48小时组大鼠染色最为明显。胸部创伤组大鼠肺组织湿/干质量比:胸部创伤组大鼠与空白对照组大鼠相比,胸部创伤组大鼠肺组织湿/干质量比明显低于空白对照组。ELISA:血清及肺泡灌洗液中TLR-9、IL-6表达水平,胸部创伤组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR回示:胸部创伤组肺组织中TLR-9 mRNA、IL-6 mRNA的表达较空白对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot回示:胸部创伤组肺组织中TLR-9蛋白水平较空白对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大鼠创伤后TLR-9表达的增高,提示TLR-9参加了肺挫伤炎症反应的过程。
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