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柑橘是我国重要的生产果树,在柑橘应对不同环境胁迫中,ABA都起到了积极的作用。本论文以抗旱耐盐的印度酸橘(Citrus reshni Hort.ex tan)为研究材料,利用同源序列法,克隆了脱落酸合成途径中的限速酶(9-顺环氧类胡萝卜素双加氧酶NCED)基因,通过半定量PCR的方法研究了不同胁迫条件(低温4℃、干旱、盐、外源ABA胁迫)下该基因的表达情况,结合Southern杂交确定了该基因的拷贝数；通过构建CrNCED3基因的表达载体,利用农杆菌介导的遗传转化手段,将其转入烟草(Nicotiana nudicaulis)中,并对转基因植株在干旱条件下的表现进行鉴定,初步分析了CrNCED3基因的功能。取得的主要研究结果如下：1、克隆了印度酸橘叶片中的9-顺环氧类胡萝卜素双加氧酶基因(CrNCED3)开放阅读框架,其cDNA长1821bp,编码606个氨基酸。内含子比对证明CrNCED3没有内含子。多重序列比对显示,该基因与其他物种中NCED基因高度同源达60%以上。进化分析认为其功能可能与拟南芥AtNCED3相近。iPSORT预测表明：CrNCED3基因N-端有叶绿体转运肽。Southern杂交显示该基因在印度酸橘中可能是单拷贝存在。2、以柑橘中的β-Actin作为内参,对靶基因CrNCED3进行半定量PCR扩增。不同器官中的表达分析显示,在正常生长状况下CrNCED3在根中表达量低,茎、叶中表达量高,其表达具有组织特异性。在胁迫条件下,叶片中CrNCED3能被干旱和外源ABA所诱导,其表达量随着处理时间的持续而增加,一旦逆境条件解除,基因表达量也随之下降,表现出瞬时性的表达特点。4℃低温和200 mM高盐胁迫不能诱导该基因使其在叶片中的表达量增加。CrNCED3在不同逆境下的表达不同,结合前人研究,说明NCED基因家族的表达模式各不相同。3、构建了35S::CrNCED3双元表达载体,利用农杆菌介导的遗传转化手段成功转入烟草,经鉴定得到了17株阳性转基因植株。4、对过表达CrNCED3基因的T0代转基因和野生型烟草无菌苗进行脱水处理,测定相对失水率、相对电导率,同时进行DAB和NBT染色。结果显示,转基因烟草株系较野生型相对失水率、相对电导率较低,说明转基因株系水分状况较好,细胞膜伤害程度较小；DAB和NBT染色颜色较浅,说明转基因烟草叶片中超氧阴离子含量低。初步证明,转CrNCED3基因能提高烟草抗旱性。