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金钱鱼（Scatophagus argus）味道鲜美，肉质细嫩，在我国沿海及内地经济较发达城市以及台、港、澳、韩国、日本、泰国等地有广阔的市场，目前市场价格达100～200元/公斤。迄今，金钱鱼大部分养殖种苗仍然来自野生资源，数量有限且呈逐年减少之势，因此对其人工种苗的需求量日益加大。本研究以金钱鱼为研究对象，用不同温度（23℃、26℃、29℃）和鱼油梯度（0、2%和6%）分别处理2龄雌性金钱鱼6周和8周，采用RT-PCR和RACE法，克隆金钱鱼叉头转录因子（Foxl2）、脑型芳香化酶基因（Cyp19a1b）cDNA全长以及卵黄蛋白原（Vtg）cDNA片段，并应用实时荧光定量PCR检测了两种处理对Foxl2在卵巢、Cyp19a1b在脑垂体以及Vtg在肝脏和卵巢中mRNA表达的影响；同时，分别应用比色法、放射免疫测定法（RIA）以及连续组织切片技术，检测了两种处理对卵巢发育过程中血清中蛋白磷（SPP）、蛋白钙(SPC)、性类固醇激素（雌二醇：E2,睾酮：T）以及组织学变化的影响，为解决金钱鱼人工繁育问题提供理论依据。主要结果如下：1.温度和鱼油含量对金钱鱼卵巢组织学变化的影响温度处理实验结束（6周）时，23℃和26℃组金钱鱼卵巢中出现Ⅲ时相卵母细胞，而29℃组仍和实验前一样，卵巢内充满Ⅱ时相卵母细胞；鱼油处理实验结束时（8周），6%鱼油组金钱鱼卵巢中出现Ⅳ时相中后期卵母细胞，2%鱼油组卵巢中Ⅲ和Ⅳ时相卵母细胞并存，而对照组卵巢中主要为Ⅲ时相卵母细胞。2.温度和鱼油含量对血清性类固醇激素及生化指标的影响温度对血清中T水平无显著影响；3周时，23℃和26℃组血清中E2水平略高于29℃组，但6周时两者显著大于29℃组（P <0.05）；实验期间23℃和26℃组血清中SPP含量显著高于29℃组（P <0.05），而SPC含量仅23℃组显著高于29℃组（P <0.05）。实验期间2%和6%鱼油组的E2逐渐升高，且在8周时均显著高于对照组(P <0.05)，而对照组E2无显著变化；对照组和鱼油投喂组SPP值均逐渐上升，且8周时6%鱼油组的SPP值显著高于对照组和2%鱼油组（P<0.05）；各鱼油处理组SPC和T水平在实验中期（4周）达到峰值，此后下降。3.温度和鱼油含量对金钱鱼Foxl2基因表达的影响金钱鱼Foxl2cDNA全长2024bp，其开放阅读框（ORF）包含918bp，编码305个氨基酸，包括104个氨基酸组成的FH结构域（FH-domain），5’端非编码区（5’-UTR）有226bp，3’-UTR（不包括poly（A））有848bp，推测其蛋白质分子量为34.365kDa。序列分析及分子系统进化树结果表明，金钱鱼Foxl2与其它非哺乳类脊椎动物一样，缺少14个丙氨酸组成的聚丙氨酸重复区和甘氨酸-脯氨酸重复区，其氨基酸序列与网纹石斑鱼同源性最高，为98.4%，同源性分析结果与根据传统形态学和生化特征分类的结果相一致。实时荧光定量PCR结果显示，随处理时间的延长，23℃和26℃组金钱鱼卵巢中Foxl2mRNA的表达量均逐渐增加，且26℃组的表达量显著高于23℃组（P<0.05），而29℃组表达量先略增加再回到实验前水平；鱼油处理实验显示，2%和6%鱼油组金钱鱼卵巢中Foxl2mRNA的表达量均逐渐增加，但两组间无显著差异（P>0.05），对照组金钱鱼卵巢中Foxl2mRNA的表达量无显著变化。4.温度和鱼油含量对金钱鱼脑型芳香化酶Cyp19a1b基因表达的影响金钱鱼Cyp19a1b cDNA全长2409bp，其开放阅读框（ORF）包含1506bp，编码501个氨基酸，5’端非编码区（5’-UTR）有164bp，3’-UTR（不包括poly（A））有712bp，推测其蛋白质分子量为56.697kDa。序列分析及分子系统进化树结果表明：金钱鱼Cyp19a1b氨基酸序列与黄锡鲷和舌齿鲈Cyp19a1b同源性较高，分别为86.2%、86.5%，但与鱼性腺芳香化酶（Cyp19a1a）同源性低于63.5%，同源性分析结果与根据传统形态学和生化特征分类的结果相一致。实时荧光定量PCR结果显示，随处理时间延长，26℃和29℃组金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA的表达量均逐渐降低，但29℃组显著低于26℃组（P <0.05），而23℃组在6周时则显著高于26℃和29℃组（P<0.05），约为26℃组表达量的2倍；2%和6%鱼油组金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA表达量逐渐降低，但鱼油对金钱鱼脑垂体中Cyp19a1b mRNA的表达量无显著影响（P>0.05）。5.温度和鱼油含量对金钱鱼Vtg基因表达的影响克隆获得金钱鱼Vtg基因保守区片段1449bp。实时荧光定量PCR结果显示，Vtg在金钱鱼卵巢中的表达量均显著低于肝脏中的表达量；23℃和26℃组金钱鱼Vtg在肝脏中的表达量随处理时间延长而增加，而29℃组Vtg表达量不变，23℃和26℃组Vtg表达量无显著差异（P>0.05），但6周时显著高于29℃组(P <0.05)；8周时，6%鱼油组Vtg在肝脏中的表达量明显高于对照组和2%鱼油组（P <0.05）。综上所述，金钱鱼卵巢发育的适宜温度范围为23～26℃，6%鱼油可有效促进金钱鱼的卵巢发育；在一定范围内，水温和鱼油含量的增加可通过提高血清中E2、肝脏中Vtg mRNA以及卵巢中Foxl2mRNA表达等促进金钱鱼卵巢发育；Cyp19a1b可能不是引起金钱鱼卵巢发育的直接因素，但可能通过“下丘脑脑垂体性腺轴”对金钱鱼卵巢发育过程产生间接影响。