【摘 要】
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大肠癌转移是一个极其复杂的过程,是肿瘤细胞和宿主相互作用的共同结果。Kai1基因在这一过程中起抑制作用。该基因于1995年发现,其表达产物为CD82,是TM4SF(transmembrane 4 supe
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大肠癌转移是一个极其复杂的过程,是肿瘤细胞和宿主相互作用的共同结果。Kai1基因在这一过程中起抑制作用。该基因于1995年发现,其表达产物为CD82,是TM4SF(transmembrane 4 superfamily)或称TST(tetra span transmembrane)家族成员。该家族结构的最大特点是由4个疏水保守区构成跨膜区(transmembrane 1~transmembrane 4,TM1~TM4)。在TM1与TM2之间、TM3与TM4之间分别有一个较小与较大的膜外半环样结构(extracellular loop 1、extracellular loop 2,EC1、EC2),EC2区还有3个潜在的糖基结合位点,膜内则有较短的氨基和羧基末端。结构分析提示它在细胞与细胞间粘附、细胞与基质的连接中可能起有一定作用,研究也证实它可以增强肿瘤细胞之间的聚集能力,降低其吞噬能力及侵袭能力,而不影响细胞的增殖力。 目前研究证实Kai1/CD82对多种肿瘤转移具有抑制作用,但其与大肠癌转移相关性的研究尚不多,特别是其表达下调的机制未有报道。为探讨Kai1基因与大肠癌转移之间的相关性,本研究利用四种不同转移潜能的大肠癌细胞系HCT116、HT29、LoVo与SW480,从mRNA与蛋白质水平,用原位核酸杂交、免疫组织化学与Western Blot三种方法检测Kai1/CD82的表达,得到了一致的结果:Kai1/CD82在HT29与SW480细胞系的表达较LoVo与HCT116为高。 为进一步探讨Kai1基因表达下调的机制,本研究用PCR-SSCP技术分析了Kai1/CD82表达较低的LoVo与HCT116细胞系的Kai1基因第3~10外显子是否存在点突变,检测Kai1基因启动子区域CpG岛的甲基化状况,并用免疫组化与Western Blot等方法研究Kai1基因表达与p53异常之间的相关性。实验结果表明:基因点突变、启动子CpG岛甲基化、p53蛋白异常与Kai1基因表达下调不存在相关性。 本研究结果表明:Kai1基因与大肠癌细胞转移潜能有关;基因点突变、启动子CpG岛甲基化与p53异常在Kai1基因表达下调中不起重要作用。
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