外伤性白内障是眼球发生穿孔伤或顿挫伤后最常见的并发症之一，其发病率为36％-52％，也是眼外伤致盲的主要原因之一，占视力致残者的28.2％。目前有研究认为机械性损伤引起晶状体上皮细胞(lens epithelial cell，LEC)增生、移行和化生与外伤性白内障的发生发展密切相关。近年来，随着细胞“基质学”这一新概念的出现，细胞外基质的活动愈来愈受到人们的重视。其中，作为参与胞外基质降解的主要蛋白酶类之一的基质金属蛋白酶／组织金属蛋白酶抑制物(matrix metalloproteinase，MMP／tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP)系统在许多生理和病理过程中都发挥着关键的作用。组织金属蛋白酶抑制物是一类具有特异性抑制MMPs功能的分泌性多功能因子，不仅可特异性抑制MMPs对细胞外基质的降解作用(包括胶原酶、明胶酶A、B、基质分解素stromelysins)，而且可抑制基质金属蛋白酶原的活化，从而在多种生理病理过程如抑制血管新生、阻滞细胞移行及炎症反应中发挥重要作用。另外，新的研究还发现TIMPs具有直接的生长因子样作用。 关于MMPs／TIMPs系统在眼科疾病中所起的作用是近几年的研究热点，已发现TIMPs在多种眼科疾病中有异常表达，但有关TIMPs在眼球穿孔伤后外伤 硕士研究生学位论文 卜D”I山汕n人十人冰卜。们JGn讥；j；怔卜IXV少，个）w…川厂以、。＿“认川／寸［山 所致外伤性H内障家兔模刑，检测炊病发展过用。f。眼内各织织JIMk表达的叫 态变化过程，进一步探讨TthePs个眼穿孔伤引起的外伤性＊内障中的作川机制。 l 外伤（芽孔伤）性白内障动物模型的建立： 本实验采用成年家兔为试验对象，局麻下用穿刺针由角巩膜缘进针使其产生 晶状体穿孔性损伤从而建立外伤性白内障模型，结果发现穿孔伤后晶状体 100％产生不同程度的混浊，说明眼球穿孔性损伤是外伤性白内障的产生的确切因素。2．外伤后TllviP－l、2在眼组织内的表达： 动物模型建立后，随机分为4组，分别于创伤后 1大、3天、·7天和 15天用空气针处死后取出其房水、虹膜及晶状体前囊，前两者置于．80 OC冰箱保存，后者制成晶状体上皮细胞铺片。 2＊ 房水及虹膜组织中TLMPS的测量： 采用蛋白反向酶谱法测定房水及虹膜中TIMP－l、2的表达，结果发现 房水及虹膜中这两种蛋白的表达具有一致性，均在24小时内出现并在短期 （3天）内迅速消失，采用对凝胶扫描成像并测量 ZI．7KD、28KD蛋白条带 的光密度门D值）显示1天组虹膜及房水中两种蛋白的表达与对照组之间 的差异有显著性。 2．2．晶状体上皮细胞中TitAl，．l、2的表达： 将晶状体前囊膜等分为二份后进行晶状体上皮细胞铺片，用＊IMP－1、2 单克隆抗体对其进行免疫组化（S干法）分析，定量分析采用阳性面积积分 光密度为测量值。 实验组（l大、3大和7天组）的晶状体上皮细胞胞浆和细胞外基质内 可见棕黄色阳性颗粒，主要存在于胞浆中。对照组晶状体上皮细胞内表达为 阴性。定量分析结果发现实验组第1大、3天和7无两种蛋白的表达与对照 组之间存在显著差异…＜001人 且两类蛋白的高峰均出现在损伤后的第七 天人右，与对照组之间存在非常显著性差异（p＜0刀01＊ 本实验说明眼球外伤是发生并发性白内障的较为确切的病因，问时在正常眼纲织（如厉水、虹膜及晶状体L皮细胞）中未测得＊n什＊－1、2的存在，当眼球发牛穿孔性损伤后，TIMP－l、2人庆水和o！＿膜组织小沁则内有所表达爿，迅速恢复 2 硕士研究生学位论文 十小吊水卜：N卜乡川；＊八“从怖1二以细咆。卜。，。’卜人7；。丁川卜．1、三，儿。训人；’卜山人修复的后汕（约一周人人）这利。改变少为明显。以11纠果椎测0！＿膜。f·损伤J；；的X性炎症因子可能是TIMP—l、2 短期内高表达的重要调控因素，房水中的TIMP－l、2可能来0虹膜组织的分泌或是经损害的血一房水屏障释放入前房，沉积于晶状体上皮细胞及其细胞外基质中的TIMP—l、2则是晶状体卜皮细胞自分泌或旁分泌的结果。同时对动物模型的观察也表明外伤性白内障的发生发展在与TIMP－l、2在眼内的表达存在时间上的相关性，提示其高表达可能对晶状体创伤修复，以及病理条件下晶状体囊膜下细胞及细胞外基质的堆积产生了积极的作用。