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本实验以广东特产菜心品种“油青四九”为材料,研究菜心高频再生体系的构建,农杆菌转化过程中各种参数的确定,再生植株的检测等问题。并以菜心带柄子叶为外植体通过农杆菌介导的遗传转化方法将（E）-β-farnesene（EβF）基因转入菜心基因组中获得转基因再生植株,主要结果分析如下:高频再生体系的建立是遗传转化成功的前提条件,而高频再生体系的建立和外植体的种类、苗龄、激素浓度等试验条件有密切关系。本试验通过对“油青四九”菜心带柄子叶、下胚轴和子叶切块等外植体的研究,发现带柄子叶作为再生体系的外植体较为合适。同时对37d苗龄带柄子叶、6-BA和NAA浓度组合,以及AgNO3对“油青四九”再生体系的影响研究,得到“油青四九”菜心带柄子叶外植体最佳离体再生条件:1/2倍NH4+浓度的MS + 3mg/L 6-BA + 1mg/L NAA + 7mg/L AgNO3 + 2%蔗糖+ 0.8%琼脂（pH=5.8）。农杆菌介导法研究深入,技术成熟,使用范围广,尤其适合双子叶植物的遗传转化。本试验采用冻融法将含有目的基因的表达载体pBJ40转入农杆菌LBA4404当中,使用抗生素Str、Rif、Kan对阳性菌落进行筛选。阳性菌落PCR结果表明目的基因已转入农杆菌LBA4404当中,成功获得工程菌株。利用工程菌株对“油青四九”菜心带柄子叶外植体进行感染,通过对菌液浓度、感染时间、预培养和共培养时间等多个参数进行试验优化,最终得出较理想的试验条件。试验表明:将带柄子叶预培养23d,用光密度值OD600为0.5的菌液浸染8min左右,然后共培养23d。通过以上条件,带柄子叶经农杆菌浸染后再生频率可达到2.67%。pBJ40表达载体含有NPTⅡ基因,在对植株进行筛选时可以选择卡那霉素（Kan）为筛选用抗生素。试验对Kan取0.5、1、3、5、7mg/L五个浓度梯度。当Kan浓度为0.5mg/L时,多数外植体能产生不定芽,随着Kan浓度的升高,再生绿芽率逐渐下降,当Kan浓度达到5mg/L时,所有再生芽全部白化。同时采用氨苄青霉素（Amp）对农杆菌进行抑制试验,在浓度低于300mg/L时,农杆菌仍能生长,外植体周边可见菌落长出,在浓度高于300mg/L时,培养基中无细菌生长,并且在100500mg/L的浓度梯度范围内,Amp对不定芽再生的影响并不明显,最终将Amp浓度定在300mg/L。经过组织培养、农杆菌浸染等过程,最终得到4株再生植株。取再生植株叶片,用CTAB法提取基因组,经PCR扩增,结果表明4株转化植株全部扩增出目的条带,与阳性对照位于同一位置,证明目的基因已经转化入“油青四九”菜心当中。