分离培养胎鼠下颌第一磨牙牙胚间充质干细胞,初步鉴定其表型特征和细胞生物学特点;体外培养扩增并进行牙向诱导分化条件的探索;制备适合牙胚间充质干细胞粘附生长的三维支架材料,复合该细胞进行体外和体内培养,观察材料降解和新生组织替代过程的特点。 取15.5日胎龄小鼠胚胎,分离下颌第一磨牙牙胚间充质成分,酶消化法培养。倒置显微镜观察细胞形态。记录细胞生长曲线。抗CD57/HNK-1单抗、抗波形丝蛋白单抗鉴定其外胚间充质特性,端粒酶探针原位杂交测定其增殖活性和干细胞特点,抗Ⅰ型胶原单抗反映其形成基质蛋白能力。获得的原代细胞分别用含胎牛血清培养液和加入白血病抑制因子的含血清培养液进行培养,分别计算各自细胞倍增时间,抗波形丝蛋白单抗免疫组化法检测细胞纯度,牙本质涎磷蛋白(DSPP)单抗鉴定细胞牙向分化表型,以寻找可以保持细胞增殖活性同时较少影响细胞功能状态的培养条件。用NaCl浇铸成膜—离子沥滤法制备聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)多孔支架材料,检测其理化和力学性能进行优选后,复合获得的牙胚间充质干细胞,进行体外培养和动物实验,观察其细胞粘附、材料降解和新生组织的替代过程。