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目的:观察糖尿病(diabetes mellitus, DM)患者血清(diabetic serum, DS)对体外培养的内皮细胞(endothelial cells,EC)形态学、细胞存活率及培养上清一氧化氮(nitrogen monoxidum, NO)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)的影响及L-精氨酸(L-arginine, L-Arg)和姜黄素(curcumine, CC)对DS诱导的EC损伤的保护作用,探讨DS导致EC损伤的机制并为研发有效保护EC功能的新型药物提供理论依据。方法:1.建立细胞损伤模型。培养的ECV-304,加入10%DM无并发症患者血清(DS1)、10%DM有并发症患者血清(DS2)、10%健康人血清(HS)及10%生理盐水(normal sodium, NS),分别孵育30min、3h、3d,倒置显微镜下观察细胞形态学的改变、收集培养上清测定NO(NO3–/ NO2–)、MDA、LDH水平,MTT(四甲基偶氮噻唑蓝)法测定3d时细胞存活率。2.药物保护最佳浓度筛选。DS1组与DS2组比较各指标无显著差异,上清内加入DS1作为DS处理组,然后立即加入阿托伐他汀(atovastatin, AT)(1、5、10μM)、L-Arg(0.5、1.0、1.5mM)、CC(5、10、15μM)和0.1%的二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO),孵育3d,MTT法测定细胞存活率。3.药物干预研究。培养上清内加入DS后立即加入筛选出最佳浓度的AT、L-Arg、CC分别孵育30min、3h、3d,观察细胞形态、台盼蓝染色法测定细胞存活率、收集培养上清测定NO、MDA、LDH浓度。