苓甘五味姜辛汤对慢性支气管炎模型大鼠的疗效及机制探讨

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目的:本课题根据形寒饮冷伤肺的原则,采用脂多糖注入加寒冷刺激和烟雾吸入的方法建立慢性支气管炎寒饮蕴肺型大鼠模型,观察苓甘五味姜辛汤对慢性支气管炎寒饮蕴肺型大鼠肺组织病理变化及对AQP-1表达的影响,进一步探讨苓甘五味姜辛汤治疗慢性支气管炎寒饮蕴肺型的作用机理。方法:1、将40只大鼠用随机数字表法分为空白组、慢支炎组、中药干预组、寒饮蕴肺组,每组10只。2、空白组正常喂养;慢支炎组、中药干预组、寒饮蕴肺组分别于第1天和第14天用3.5%的水合氯醛腹腔注射麻醉。将200 μg(1 μg/μl)脂多糖溶液快速注入气管,然后旋转大鼠使脂多糖均匀分布于两肺。第2-30天(第14天除外),置于烟熏箱内,每天烟熏两次,每次点燃10支香烟熏30min,两次烟熏之间间隔4小时;寒饮蕴肺组和中药干预组烟熏后,进行寒冷刺激,每天12 h,直至造模结束,持续30天。3、在造模第16天开始灌胃,空白组、慢支炎组和寒饮蕴肺组灌服0.9%的生理盐水,中药干预组给予苓甘五味姜辛汤1g/ml剂量灌服,1次/天,共进行两周。4、给药两周后,禁食不禁水12h,眼球取血,采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测血清IL-2、IL-4及肺和支气管AQP-1的表达水平;组织病理学评价肺、气管、支气管的炎症改变。结果:1、各组大鼠一般情况观察:慢支炎组大鼠与寒饮蕴肺组精神出现不同程度的萎靡,出现咳嗽、喷嚏现象,可闻及痰鸣音,大部分大鼠的鼻部出现有少许白色或黄色黏性分泌物。2、组织病理学观察结果:与空白组比较,其余各组大鼠肺组织HE染色均有不同程度的气道损伤和炎症细胞浸润的炎症改变。中药组少量炎性渗出,各级支气管粘膜假复层纤毛柱状上皮无增生、萎缩,偶见细支气管及其分支有少量黏膜上皮脱落或红细胞渗出,各级支气管腔内及肺泡内未见渗出水液、出血。3、各组大鼠血清IL-2、IL-4检测结果:与空白组相比,寒饮蕴肺组、慢支炎组的IL-2、IL-4表达水平明显升高(P<0.05);中药组IL-2、IL-4表达水平有所上升(p>0.05),但差异无统计意义;与寒饮蕴肺组比,中药组IL-2、IL-4表达水平显著降低(P<0.05),差异具有统计意义。4、各组大鼠肺和支气管组织AQP-1检测结果:与空白组相比,寒饮蕴肺组、慢支炎组大鼠肺组织、支气管AQP-1表达水平降低(P<0.01),中药组的肺组织、支气管AQP-1表达水平降低(P<0.05),差异具有统计意义。结论:慢性支气管炎寒饮蕴肺型模型复制成功。IL-2、IL-4、AQP-1的表达水平与慢支炎病情活动性和严重程度有相关性,可反映肺组织的损伤程度,对病情评估和治疗效果评价有指导意义。苓甘五味姜辛汤可降低IL-2、IL-4、提高AQP-1的表达,从而调节气道液体分泌和炎症因子表达,起到治疗慢支炎的作用,这可能是苓甘五味姜辛汤治疗寒饮蕴肺型慢支炎的机制之一。
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