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目的:探讨小鼠脂肪间充质干细胞(adipose tissue-derived stromal stem cells,ADSCs)同种移植对损伤子宫内膜的治疗作用,为人类薄型子宫内膜的治疗、提高妊娠率提供实验依据和理论基础。方法:1小鼠子宫内膜损伤模型的制备:选取6～8周龄昆明白雌性小鼠,随机分为三组:实验组,对照组,空白组。在小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素(preganant mare serum gonadotropin,PMSG)10 IU/只,使小鼠动情期同步化,同时取小鼠阴道分泌物涂片、显微镜下观察确定动情期。48小时后,实验组小鼠经阴道向子宫腔内注射95%酒精0.1ml,作用5min后用DPBS冲洗阴道3次;对照组小鼠经阴道向子宫腔内注射DPBS0.1ml;空白组不做任何处理。注射后2h、第1及第2个动情周期的动情期,取每组小鼠子宫组织,固定、制作石蜡切片,进行HE及Masson染色,显微镜下观察子宫内膜组织细胞的变化,采集图像,利用IPP6.0软件计算子宫内膜的厚度、腺体数量及纤维化面积百分比。2绿色荧光转基因小鼠脂肪间充质干细胞(adipose tissue-derived stromal stem cells from green fluroescent protein transgenic mouse,GFP-ADSCs)的解冻、培养,细胞传代培养48h后胰蛋白酶消化,离心收集细胞2X10~5/ml与3D凝胶以1:1体积混合用于细胞治疗。3脂肪间充质干细胞同种移植治疗子宫内膜损伤小鼠:将子宫内膜损伤小鼠分为三组,在模型制备4h后,治疗组小鼠经阴道向宫腔内注射GFP-ADSCs+3D凝胶0.1ml;对照组1注射3D凝胶;对照组2注射DPBS;空白组为子宫内膜未损伤小鼠。于移植后的第1及第2个动情周期的动情期,取每组小鼠子宫组织,固定、制作石蜡切片,进行HE及Masson染色,显微镜下观察子宫内膜组织细胞的变化,采集图像,利用IPP6.0软件计算子宫内膜的厚度、腺体数量及纤维化面积百分比。同时利用荧光显微镜观察治疗组的组织细胞切片,确定组织中是否具有绿色荧光细胞。结果:1小鼠子宫内膜损伤模型制备后2h和第1个动情期,实验组小鼠子宫内膜厚度显著降低,与对照组和空白组比较有显著性差异(p<0.05),对照组和空白组比较没有显著性差异。第2个动情期实验组小鼠子宫内膜厚度仍低于对照组和空白组,但是三组间比较没有显著性差异(p>0.05)。实验组小鼠子宫内膜腺体数量在2h、第1个动情期、第2个动情期均低于对照组和空白组,且具有显著性差异(p<0.05),对照组和空白组比较腺体数量无明显差异。实验组子宫内膜组织纤维化面积在2h、第1个动情期、第2个动期均明显增加,尤其在第1个动情期纤维化面积达到13.62%,实验组三个阶段纤维化面积与对照组和空白组比较均有显著性差异(p<0.05),对照组和空白组之间比较子宫内膜纤维化面积无显著性差异(p>0.05)。2 GFP-ADSCs解冻后体外培养,显微镜下观察细胞贴壁生长,呈长梭形,荧光显微镜下观察细胞发绿色荧光。3 GFP-ADSCs治疗子宫内膜损伤小鼠后,治疗组在第1个动情期子宫内膜厚度明显增加为424.51um,接近于空白组(394.63um),但是与对照组(279.77um,265.91um)比较具有显著性差异(p<0.05)。在第2个动情期治疗组内膜厚度增加显著,达到646.21um,与空白组、对照组均有显著性差异(p<0.05)。治疗组子宫内膜腺体数量在第1、2个动情期均显著增加,与对照组比较有显著性差异(p<0.05),与空白组比较均没有显著性差异(p>0.05)。治疗组子宫内膜纤维化面积在第1个、第2个动情期显著减少,与对照组比较有显著性差异(p<0.05),与空白组比较均没有显著性差异(p>0.05)。不同动情周期,对照组1和对照组2小鼠的子宫内膜厚度、腺体数量、纤维化面积之间比较均没有显著性差异。4荧光显微镜下观察治疗组小鼠子宫内膜组织切片中未见荧光细胞。结论:成功建立了小鼠子宫内膜损伤模型;GFP-ADSCs能够修复子宫内膜损伤小鼠的子宫内膜;GFP-ADSCs可能通过旁分泌途径促进子宫内膜组织细胞的损伤修复。该研究结果对于辅助生殖技术中薄型子宫内膜患者的治疗具有非常重要的意义和临床应用价值。