桔梗组织培养研究

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桔梗(Platycodon grandiforus)为桔梗科桔梗属的多年生草本植物,其根入药,具有宣肺、镇咳、祛痰、消炎、解热、镇静等诸多药效作用。桔梗兼药、食、观赏为一身,且常年出口到东亚各国,属于现有的稀缺天然植物药[1]。本文主要通过对其种子的不同浸种处理方式及添加不同培养液后对种子出芽率及出芽势的不同影响作了研究,又通过对桔梗的丛生芽诱导培养,增殖培养,生根培养及再生苗移栽等都做了系统的实验研究。利用发根牛肝菌感染桔梗的茎尖和茎段,通过诱导桔梗的不同部位发生毛状根,其不同诱导结果作了分析比较。结果表明:用40-50℃温水浸泡种子14h,然后再用蚕丝液培养的组合(bⅣ)发芽率表现为最好,可达到92%;其次是用40-50℃温水浸泡种子14h后又用3%的KMnO4溶液浸泡5h,并通过蚕丝液培养的组合(dⅣ),发芽率也在90%以上。而在种子发芽势的考察中,最高发芽势为58%,最低发芽势为20%,平均发芽势为37.94%,处理组合之间存在明显的差异性。其中,用40-50℃温水浸泡14h后,再用装有蚕丝液培养的种子发芽势最高达到58%(dⅣ)。不同处理方式之间以及不同培养液之间均表现出明显的差异性,浸种方式和培养液之间的交互作用也呈现明显区别。在本实验的条件下,诱导桔梗外植体丛生芽的最适培养基为添加0.3mg/L的6-BA和添加0.05mg/L的NAA的MS培养基。最适合桔梗苗诱导丛生芽并考虑其长势和继代增殖的培养基是添加2.0mⅡg/6-BA和0.5mg/L NAA的MS培养基,而最适于桔梗生根的培养基则是添加0.2mg/L NAA的1/2MS培养基。在诱导桔梗的毛状根时,无论是桔梗的叶片还是茎段,随着NAA浓度的升高,诱导毛状根的产生率有所不同,低浓度时,毛状根直接在接种的外植体上长出;当NAA高浓度时,则先脱分化形成愈伤组织,而后在外植体表面形成白色绒毛状的根状物。
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