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氰化合物(无机氰化物、有机氰化物,CN-)广泛应用于化工合成、电镀、贵金属冶炼萃取、制药、印刷等行业和军事工业中,其中无机氰化物(氰类)多为剧毒物质,高浓度氰化氢吸入,或口服50～100mg的氰化钠即可迅速引起呼吸停止,甚至死亡;长期低剂量接触氰化物,可引起慢性毒性作用,抑制机体内碘的转运和甲状腺激素的合成,妨碍机体对碘的利用,引起甲状腺肿大。我国GBZ2.1《工作场所有害因素职业接触限值》中对有11种氰化物制定了限值。氰化合物可通过呼吸道、胃肠道及皮肤侵入体内,无机氰化物在硫氰酸盐生成酶的作用下与硫反应,进而将氰基转化为低毒性的硫氰酸基,从而形成硫氰酸根以尿的形式排出体外。有机氰化物在肝脏的细胞色素P450作用下,会代谢为氰环氧化合物或氰醇,之后生成氢氰酸,引起亚急性的氢氰酸中毒症状,最后部分有机氰化物经硫氰酸盐生成酶的作用下生成硫氰酸盐以尿的形式排出体外。以往研究确认尿中的硫氰酸根是接触氰化物的代谢生物标志物。但国内外尚未制定氰化物的职业接触生物限值。目前尿中硫氰酸根(SCN-)的检测标准方法为《尿中硫氰酸盐的吡啶-巴比妥酸分光光度测定方法WS/T 39-1996》,该方法存在特性较差,灵敏度低等问题。为制定尿中硫氰酸根检测标准方法,本文对尿中硫氰酸根离子色谱检测方法进行了规范研究。本研究对离子色谱的色谱柱、淋洗液浓度、流动相流速等条件和参数进行了研究和优化,对样品的稀释倍数、离心效果、固相萃取柱的选择等进行比较,确定了样品预处理方法;对不同保存条件下尿液样品的稳定性进行实验;对方法的线性范围、方法检出限、方法定量下限、准确度、精密度、干扰情况等进行实验;并对接触乙腈的暴露人群的尿液样品进行了应用测定。尿样预处理方法:①取10mL尿样加入15 mL离心管中,将尿样以4000r/min,离心10 min。②准确量取上层尿样1.OmL于10 mL容量瓶中,用去离子水定容至刻度,用涡旋振荡器振摇1 min混匀。③将C18固相萃取小柱活化后,取3mL稀释后的尿液样品于活化好的C18小柱中,使样品因重力作用自然通过小柱;重复2次,弃去第一次滤液,留取第二次滤液,两次间隔不超过5min。④将滤液用0.22 μm针式尼龙滤膜过滤后,于进样瓶中待测。离子色谱仪测定条件:色谱柱:IonPacAS16(250mmx4mm)、IonPaeAG16保护柱;梯度淋洗模式:0～15min,KOH淋洗液浓度35mmoL/L;15.1～18.0min,KOH淋洗液浓度70mmoL/L;18.1～23.0min,KOH淋洗液浓度35mmoL/L;淋洗液流速:1.0mL/min;抑制电流:179 mA;进样量:25μL。尿样保存条件:尿液样品可在室温下储存5天;4℃条件下储存7天;-20℃条件下储存14天。方法的性能指标:本方法采用标准曲线外标法进行定量检测,硫氰酸根的含量在0.1μg/mL～25.0μg/mL范围内线性良好,相关系数r=0.9999。方法最检出限为0.11μg/mL,方法定量下限为0.35μg/mL,正常人尿液的加标回收率为95.1%～99.9%,批内精密度为0.54%～2.05%,批间精密度为2.06%～5.09%。尿液中可能共存的阴离子如Cl-、F-、NO3-、SO42、Br-、1-、CH30O、CO32-、CN-等均对待测物的测定不构成干扰。方法应用:对某化工厂乙腈车间8名生产工人的尿样进行检测,尿样中硫氰酸根的浓度在0.11～7.30μg/mL之间,平均浓度为3.35μg/mL。本研究采用C18固相萃取小柱做样品净化手段,减少了有机溶剂的使用,本法的检出限为0.11 μg/mL,较国标方法有所提高,方法的性能指标能满足《职业卫生标准制定指南生物材料中化学物质测定方法》(GBZ/T210.5-2008)的要求。通过现场应用表明该方法适用于氰化物职业接触人群中尿中硫氰酸根的测定。