油菜蜂花粉水溶活性成分的分离与结构鉴定

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油菜(Brassica Campestris L.)是十字花科白菜的变种,油菜蜂花粉是工蜂采集的油菜的花粉粒,并加入了花蜜和蜜蜂的唾液等,经加工而成的花粉团状物。蜂花粉中含有多种生物活性成分,是一种天然的营养保健食品。大量文献报道,油菜蜂花粉具有提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化延缓衰老等活性作用,但这些功能的物质基础尚不清楚。本文利用油菜蜂花粉作为研究材料,对其水提物的活性以及组成成分进行了初步研究。(1)油菜蜂花粉经粉碎后,利用85%乙醇溶液脱脂处理,再经60℃热水浸提得到蜂花粉的水提物。水提物经95%乙醇溶液沉淀,过滤得醇沉和醇溶两部分。利用环磷酰胺建立的小鼠免疫力低下模型对这两部分提高免疫力活性进行了研究,结果表明,在200mg/kg的剂量下,水提醇沉组分能显著提高小鼠的胸腺重量(P<0.05)、胸腺指数(P<0.05)和脾脏重量(P<0.05);水提醇溶组分能显著提高小鼠的胸腺重量(P<0.05)、胸腺指数(P<0.05)、脾脏重量(P<0.05)和脾脏指数(P<0.05)。利用D-半乳糖建立的小鼠衰老模型对这两部分抗氧化活性进行了研究,结果表明,在200mg/kg的剂量下,水提醇沉组分能显著降低小鼠脑MAO活力(P<0.05),显著提高小鼠肝脏SOD活力(P<0.05);水提醇溶组分能显著降低肝中MDA含量(P<0.05)。(2)利用AB-8大孔树脂、MCI凝胶和ODS等色谱柱对醇溶部分进行分离,得到三种主要单体化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ。经核磁共振法鉴定,得出化合物Ⅰ为鸟嘌呤核苷,化合物Ⅱ为腺嘌呤核苷,化合物Ⅲ为胞腺嘧啶脱氧核苷,三种化合物均首次从油菜蜂花粉中分离得到,其中鸟嘌呤核苷和胞腺嘧啶脱氧核苷在油菜蜂花粉的研究中首次报道。(3)对醇沉部分的主要成分进行分离,通过AB-8大孔树脂、MCI凝胶、DEAE纤维素凝胶、HW-55F、Sephacryl S-400和Sephadex G-100等柱色谱手段进行分离,得到一种主要单体化合物A,经核磁鉴定,为一种尚少见的多糖类,其结构如下:
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