初情期是动物从幼年向获得繁殖能力的过渡时期,也是雌性动物初次发情并排卵的时期,象征着母畜具备了繁衍生息的能力。以往关于初情期的研究多集中在啮齿类和灵长类动物,因其机制较为复杂,目前研究尚不完善。本研究利用F-MSAP技术和BSP方法双结合的思路探索DNA甲基化对母羊初情期启动关键基因在下丘脑表达的影响。研究结果如下:1、在初情期启动的三个发育阶段中共发现了2409个条带,且主要集中于21-309bp。初情期前和临近初情期阶段以全甲基化模式为主,初情期阶段以半甲基化模式为主。初情期启动时下丘脑的总体甲基化水平为34.20%,显著低于临近初情期(61.96%)阶段,P<0.05。表明,在母羊初情期启动前后,DNA甲基化的模式和水平存在显著差异。2、在初情期发育过程中,NKB基因在母羊下丘脑中有表达,且随着初情期的发育,NKB基因表达量逐渐升高,且初情期和临近初情期显著高于初情前期阶段。3、随着初情期的启动,NKB启动子区总体甲基化水平显著降低,初情期总体甲基化水平与临近初情期阶段差异不显著;启动子区特定位点(-1261、-1254和-836bp)甲基化水平显著降低。本研究表明,基因组DNA甲基化和NKB基因发生甲基化是影响母羊初情期启动的重要因素。