曼地亚红豆杉枝条中紫杉醇的提取纯化研究

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本文系统研究了曼地亚红豆杉枝条中紫杉醇的提取和纯化过程。在建立定性和定量分析方法基础上,对紫杉醇的提取和粗提浸膏的纯化进行考察,并对该提纯工艺条件进行优化。首先,本文建立了紫杉醇的薄层色谱(TLC)定性分析方法和高效液相色谱(HPLC)定量分析方法。TLC展开剂为三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(88:7:5,v/v/v),紫杉醇比移值Rf=0.48。HPLC色谱条件:色谱柱为phenomenex C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-水(53:47,v/v);流速0.8mL·min-1;柱温28℃;进样量10μL;紫外检测波长228nm。其次,本文探索了紫杉醇的溶剂浸提、超声提取和超临界CO2流体萃取工艺,考察工艺参数对紫杉醇提取效果的影响。溶剂浸提的最佳工艺条件为:乙酸乙酯一丙酮(1:1,v/v)混合溶剂为溶媒、用量为14倍量(mL/g原料)、浸提时间7h、浸提温度45℃、原料粒径小于0.250mm、三级提取,经初步萃取后所得浸膏中紫杉醇的纯度为1.07%,提取率为97.76%。超声提取的最佳工艺条件为:提取时间1.5h、浸提温度40℃、溶媒乙酸乙酯-丙酮(1:1)的用量为12倍量、超声波功率70W,经初步萃取后所得浸膏中紫杉醇的纯度为0.86%,提取率为98.59%。对于超临界CO2流体萃取,当分离釜Ⅰ和Ⅱ温度为30℃、压力为6.5MPa、CO2体积流量为25L/H条件下,其最佳工艺条件为:萃取压力30Mpa、萃取温度47℃、萃取总时间3.5h(静态萃取0.5h,动态萃取3h)、夹带剂乙醇体积分数Φ(CH3CH2OH)=85%,该工艺条件下所得浸膏经初步萃取后紫杉醇的纯度为1.75%,提取率为90.70%。论文探索了提取机理,建立了提取动力学模型,并通过实验进行验证。最后,本文研究了紫杉醇粗提物的纯化工艺。浸膏分别经石油醚固-液萃取、氯仿-水分配萃取、硅胶柱层析、制备型薄层层析、甲醇-水体系沉淀结晶等纯化处理,最终得到纯度为73.16%的紫杉醇固体。
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