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石蒜(Lycoris spp.)为主产我国的著名观赏及药用植物,近年来存在种质资源破坏严重,收集、保存与育种相对滞后的问题。组织培养不仅是快速繁殖的有效方法,同时也是种质保存(超低温保存)及创新的基础。本试验以红花石蒜为代表样本,对其鳞茎及生长点的组织培养进行研究。同时,对石蒜属植物6个类群的鳞茎组织培养及红花石蒜其它器官的组织培养进行探索。 除对原生地进行保护,建立种质资源圃外,超低温(-196℃)保存是目前种质保存最为长期稳定和经济的选择。近年发展的玻璃化超低温保存技术因其简易有效,正被广泛使用。本试验采用玻璃化法试图建立红花石蒜茎尖的超低温保存技术体系,得到再生植株,为长期保存石蒜及鳞茎类植物的种质资源提供参考。主要结果如下: ·石蒜组织培养研究 以红花石蒜(Lycoris radiata)的鳞茎切块及生长点为材料,采用不同激素配比的MS培养基,对离体小鳞茎的分化和增殖进行研究。其中BA 3mg/L及NAA 1.5mg/L的培养基,诱导率最高,可达53%,诱导生成的小植株强健整齐,为超低温保存研究提供适用小鳞茎2000多株。 石蒜生长点在含不同激素的培养基上可形成3种不同类型的愈伤组织,其中在2,4-D 2mg/L、BA 0.5mg/L及在NAA 3mg/L、BA 3mg/L的培养基上,有胚性愈伤组织产生,转入分化培养基可再生植株,应是进行超低温保存的理想材料。 以红花石蒜为模式植物,对中国石蒜、换锦花、白花石蒜、江苏石蒜、稻草石蒜、忽地笑等6种石蒜属不同类群的鳞茎进行组织培养。除忽地笑外,其它均可诱导出芽或小鳞茎,进一步为石蒜属资源的超低温保存平台创造了条件。 对红花石蒜其它器官如叶片、花丝、花药及种子或幼胚的组织培养进行探索,前期均可诱导出愈伤组织,其中种子及幼叶有再生植株产生。 ·红花石蒜茎尖玻璃化超低温保存技术研究 切取直径1-5 mm不同大小的红花石蒜茎尖进行玻璃化超低温保存,其中2-3mm的石蒜茎尖成活率最高(80%-90%)。茎尖的完整性对成活率及再生率均有影响,带根芽原基的茎尖组织在恢复培养时可同时发根长芽,长势强。 对比预培养环节中不同浓度蔗糖及不同预培养天数对成活率的影响,结果显示蔗糖浓度为0.4 mol/L培养基上预培养3d时,茎尖成活率最高,达80%;而当蔗糖