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烘烤调制期是影响烟叶挥发性香气物质形成的重要阶段。许多研究指出在烤烟挥发性香气物质中,萜类物质新植二烯占总量的60-80%,是含量最高的一种;调制变黄期是新植二烯积累的主要时期。虽然早已有关于烟叶中新植二烯来源的推测,但至今未见相关实验研究的具体报道。为研究烟叶中新植二烯的来源,本研究以烤烟品种云烟87为供试材料,在烟叶调制变黄阶段进行动态取样,定量分析了烟叶的还原糖、叶绿素和新植二烯的含量,并测定了烟草萜类代谢途径中重要基因的表达状况。主要研究结果如下:1.在变黄期,烤烟叶片还原糖含量波动大,总体呈现先上升后下降的规律;在烘烤第40h和64h出现两个高峰,在烘烤第48h-56h之间出现波谷:含量最高点出现在烘烤第64h,为干叶重的14.3%。叶绿素在变黄期不同阶段分解速度不同,体现出前期分解快、中期分解慢、中后期分解快、后期分解慢的规律;到变黄期结束时其含量已从烘烤前的1.6mg/g降低至0.1mg/g。新植二烯含量总体呈现波动上升趋势,在烘烤第32h、56h出现两个波峰,在烘烤40h、72h出现两个波谷;到80h其含量由0.03mg/g增加到0.359mg/g。2.对烘烤变黄期基因表达强度的研究应该在烘烤开始后48h以内进行。对DXR和GGPPS基因在25℃和38℃下的转录表达进行分析比较发现,在1h以内38℃处理组表达量高于25℃组,4h以后38℃处理组表达量低于25℃组,说明高温胁迫在1h以内有利于两基因表达,4h后会对两基因表达产生抑制;38℃条件下DXR基因表达量在12h时最高,GGPPS基因表达量在4h最高,说明高温对两基因表达的影响不同;25℃条件下两基因表达量都在4h最高,但DXR基因表达量在4h之后降幅低于GGPPS基因,说明在常温离体环境下两基因表达的变化不同。对烘烤变黄期烤烟叶中DXS、DXR、IspH、IPI、GGPPS、HMGR、MK和MDC这八个萜类物质代谢酶对应基因表达量进行动态测定,发现调制之前烤烟叶片中的MVA途径和MEP途径表达量差异很大,前者约是后者的10倍;调制过程中MVA途径相关基因表达量变化更为明显,MEP途径限速酶相关基因表达量相对稳定。3.通过对比不同时间点叶绿素与新植二烯的含量,发现两者的变化规律不吻合;定量计算结果表明,叶绿素降解不能完全解释新植二烯的产生原因。新植二烯的含量变化规律与还原糖的含量变化规律有关,说明变黄期烟叶中的新植二烯可能有部分来源于萜类代谢MVA途径或MEP途径;灰色关联度分析结果表明,MEP途径相关基因表达状况与新植二烯含量关系更为密切。