目的:阐明黄芪葛根汤抗糖尿病肾病的药效物质基础,建立黄芪葛根汤谱效结合的指纹图谱。方法:采用系膜细胞与巨噬细胞共培养的Transwell模型,观察黄芪葛根汤对AGEs诱导的系膜细胞炎症的抑制作用,研究其抗炎活性。采用高效液相对黄芪葛根汤提取液进行分析,对色谱条件(包括检测波长、流动相、色谱柱、洗脱梯度等)进行了优化,建立黄芪葛根汤的指纹图谱,并按照《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》的要求,应用“中药色谱指纹图谱相似性评价系统2004A版”对指纹图谱进行相似度评价以及专属性、精密度、重复性和稳定性等方法学考察。以大鼠肾小球系膜细胞为固相化材料,与HPLC指纹图谱联用,优化实验条件,包括样品前处理、未结合成分的洗脱次数等,建立系膜细胞固相化模型,通过已建立的抗炎细胞模型对筛选出来的药效物质进行药效学验证。采用HPLC指纹图谱与ESI-MS联用,对细胞膜固相化中的未结合成份、膜上的结合成分和细胞内成分进行指纹图谱、质谱数据的分析和鉴定,解析系膜细胞相结合的药效物质结构。结果:黄芪葛根汤高、中、低剂量组对AGEs诱导的系膜细胞炎症有显著的抑制作用,且显示出一定的量效关系。黄芪葛根汤的指纹图谱条件专属性、重复性、精密度和稳定性良好,10个批次提取液间的指纹图谱相似度均高于0.97,均符合要求,适用于黄芪葛根汤的质量控制。药效学研究表明,10倍量细胞破碎液对系膜细胞炎症模型具有显著的抑制作用,表明采用细胞固相化可以筛选出黄芪葛根汤中具有抗炎活性的药效物质,通过质谱数据搜索匹配、解析药效物质的结构,确认了细胞膜上结合成分为葛根素,进入细胞的成分为葛根素、3’-甲氧基葛根素、葛根素木糖苷、大豆苷、芒柄花苷、大豆苷元。结论:本研究通过细胞膜固相色谱与HPLC指纹图谱的联用,初步阐明了黄芪葛根汤的抗炎活性成分,为其进一步的新药开发和质量控制的研究奠定了基础,达到预期目的。